油桐组织快繁与离体再生体系的建立

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:eu2005
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
油桐(Vernicia fordii)属大戟科(Euphorbiaceae)油桐属(Vernicia L.)落叶乔木,是我国特有的木本油料经济树种之一。桐油是极好的干性油,并且是极具潜力的生物柴油资源。油桐的传统栽培繁殖方式较为单一,其常规繁殖方法以实生苗繁殖和嫁接繁殖为主,扦插繁殖较为困难,而如组织培养和非试管快繁技术等较为先进的育苗技术的发展则更为缓慢。因此,为了保持油桐优良品种的性状,进行组织培养快速繁殖,通过工厂化获得大量优质苗木,具有重要的意义;同时建立油桐离体再生体系,将为进一步通过转基因技术培育油桐优良品种奠定良好的基础。主要结果如下:1、油桐组培快繁体系的建立本研究以野外多年生和温室一月生油桐顶芽为研究材料,摸索了其消毒方式,结果发现野外多年生外植体消毒效果不佳,存活率低,温室一月生外植体最佳消毒方式为75%酒精30s+0.1%Hgcl2时间10min;获得的温室一月生外植体无菌苗经过初代培养——继代培养——生根培养后获得完整植株;其中初代培养最佳启动培养基为MS+1.5mg/L6-BA+0.01mg/L IBA,启动较快,诱导率达到66.51%,有效芽数最高;继代增殖培养基最优组合为MS+1.0mg/L6-BA+0.01mg/L IBA,增殖系数达到3.1,植株生长正常;再生植株进行生根培养,最佳培养基1/2MS+0.5mg/L IBA,根粗壮,平均根数达到3.07,移栽成活率较高,可达到96.43%;在外植体褐化防治方面,向培养基中添加的80mg/L的Vc可以有效减轻褐化程度。2、油桐离体再生体系的建立本实验对油桐离体再生两条途径进行了研究,即通过愈伤组织进行植株再生和直接诱导不定芽进行再生。两条途径所用实验材料均为无菌苗真叶和下胚轴,在无菌苗萌发试验中,种子胚最佳萌发培养基为1/2MS;经愈伤组织途径进行植株再生这一途径中,真叶叶盘愈伤组织诱导最佳培养基为MS+3.0mg/L6-BA+0.5mg/L IBA;首先暗培养3w,切口处可诱导出少量淡黄色愈伤,后于光照培养2w开始分化不定芽;下胚轴愈伤组织诱导实验中下胚轴在各TDZ浓度均能100%诱导出愈伤,其中MS+0.05mg/LTDZ诱导的愈伤呈淡黄色,表面颗粒状,继续培养至60d,可以分化不定芽,将带不定芽的下胚轴愈伤放入伸长培养基MS+0.6mg/L6-BA+0.1mg/L IBA+5mg/LAgN03可成功获得理想高度植株;在直接诱导不定芽途径中,正交实验结果发现,真叶叶盘在TDZ、6-BA、IBA三种激素配比的培养基中能不同程度诱导出不定芽,其中MS+0.05mg/LTDZ+1.5mg/L6-BA+0.1mg/L IBA培养基为最佳诱导培养基,诱导率高达85.19%,且褐化程度低,方差分析发现TDZ浓度对真叶直接诱导不定芽起着显著作用;下胚轴直接诱导不定芽最适培养基为MS+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LIBA,诱导率可达56.0%,不定芽形态正常。
其他文献