【摘 要】
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分支杆菌卡介苗(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin,BCG)是长期以来一直为人们所接受的结核疫苗.为了进行分支杆菌BCG作预防和治疗性DNA载体的基础性研究,该实验
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分支杆菌卡介苗(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin,BCG)是长期以来一直为人们所接受的结核疫苗.为了进行分支杆菌BCG作预防和治疗性DNA载体的基础性研究,该实验室设计合成了编码口蹄疫病毒(Foot and Mouse Disease Virus)的O,A,C三型多肽疫苗的抗原表位序列作为外源序列,并在序列间设计了限制酶切位点,合计76肽,以质粒pUC19为载体,所构成的质粒命名为pFMDV.分支杆菌是一种生长周期很长的细菌,培养一批BCG需两周以上时间.为了确保外源基因在分支杆菌中稳定增殖,我们采用了分支杆菌整合增殖质粒pYUB295.它以热休克蛋白启动子表达四环素抗性,在BCG基因组中整合而增殖.我们把546bp调控序列插入到合成的FMDV抗原表位序列的下游后,将两者克隆到质粒pYUB295中,再将得到的质粒转化到BCG中,即可将外源基因整合到BCG基因组中并分泌表达.该文还对质粒pQE-FM进行了修饰,并研究了其在E.coli M15中的表达.
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