研究背景：　　胰腺癌是常见的消化恶性肿瘤之一，也是目前预后最差的实体性肿瘤。近年来其发病率国内外均有明显升高，在我国胰腺癌是死亡率第6位的常见恶性肿瘤。目前研究认为，胰腺癌的发生和发展是一个多基因参与、多阶段发展的过程，它与众多基因的表达及相互作用有关，而这些基因的表达是决定胰腺癌表型多样性的分子基础。胰腺癌的治疗仍以化疗为主，但是大多数药物疗效不佳且副作用较大，而胰腺癌耐药的产生是导致胰腺癌化疗失败的主要原因。研究显示，组蛋白去乙酰化酶抑制剂能够抑制HDAC的活性，从而可以选择性地调控部分肿瘤生长、增殖相关基因。曲古抑菌素A(Trichostatin A，TSA)作为一种新型的低毒性化疗药物，胰腺癌仍然对其易产生耐药性。TSA诱导建立胰腺癌耐药株后，并研究耐药株中JAK2/STAT3信号通路变化情况，进而对调控该通路来研究其耐药机制。本研究意在阐明JAK2/STAT3信号通路在胰腺癌细胞耐药机制形成中的作用，为肿瘤研究提供新思路。　　目的：　　本研究模拟胰腺癌体内耐药机制产生。首先应用IL-6诱导激活JAK2/STAT3信号通路情况，其次通过构建TSA耐药人胰腺癌细胞，检测耐药株的特性。进而干预JAK2/STAT3信号通路对耐药株所产生的影响，检测JAK2、STAT3、P-STAT3表达情况，并检测下游基因表达，探讨STAT3信号通路与胰腺癌耐药的相关性。　　方法：　　1.人体标本:免疫组化法检测病人胰腺癌组织标本中JAK2/STAT3上游细胞因子IL-6的表达情况。　　2.检测PANC-1、SW1990、AsPC-1、Patu8988人胰腺癌细胞株中JAK2/STAT3蛋白表达，通过Western bolt方法检测四种人胰腺癌细胞株中JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白的表达含量。　　3.使用TSA梯度增加浓度方法建立PANC-1-TSA耐药株，PANC-1、PANC-1-TSA人胰腺癌细胞株在IL-6刺激48小时下来激活JAK2/STAT3通路。提取 PANC-1、PANC-1-TSA蛋白和mRNA，进一步通过Western bolt检测STAT3和P-STAT3表达的变化，PCR检测c-Myc、c-Src、HIF1-α、Cyclin D1、Bcl-2、Bcl-xl的mRNA表达情况。　　4.应用JAK2抑制剂AG490(10μM，30μM，60μM)作用于PANC-1、PANC-1-TSA细胞48小时，CCK-8检测不同浓度作用下两种胰腺癌细胞株细胞活力;另外提取PANC-1-TSA的mRNA和蛋白，Western blot检测STAT3、P-STAT3蛋白表达情况，PCR检测c-Myc、c-Src、HIF1-α、Cyclin D1、Bcl-2、Bcl-xl的mRNA表达。　　结果：　　1.免疫组织化学结果显示，96例胰腺癌标本中，其中有77例标本存在IL-6蛋白的阳性表达，比例为80.2％。　　2.在四种不同胰腺癌细胞株中，Western blot结果显示在所有细胞株中JAK2和STAT3都存在表达。　　3.Western blot结果显示PANC-1-TSA细胞的STAT3、P-STAT3蛋白表达高于PANC-1细胞，c-Myc、c-Src、HIF1-α、Cyclin D1、Bcl-2、Bcl-xl的mRNA表达也显示出明显差异(P＜0.05)。　　4.在JAK抑制剂AG490(DMSO，10μM，30μM和60μM)的作用下，CCK-8检测结果显示在24小时和48小时作用下PANC-1-TSA细胞的活力低于PANC-1细胞(P＜0.05)。PANC-1-TSA细胞中STAT3和P-STAT3的表达随着AG490的浓度增加而减少，c-Myc、c-Src、HIF1-α、Cyclin D1、Bcl-2、Bcl-xl的mRNA差异(P＜0.05)　　结论：　　1.病人的胰腺癌组织存在着IL-6的高阳性表达，IL-6刺激耐药与非耐药株，中显示IL-6在胰腺癌的JAK2/STAT3信号通路起重要的作用。　　2.研究正常细胞株和耐药株之间的差异，JAK2/STAT3的通路及下游基因改变，表明了胰腺癌细胞株耐药敏感性与该通路存在相关，PCR结果显示了耐药株更强的肿瘤侵袭性和抗凋亡。　　3.JAK2抑制剂AG490作用于非耐药细胞株和耐药细胞株对比，结果显示JAK2/STAT3信号通路在胰腺癌治疗中的意义。