三种激光分析方法无分离检测的应用研究

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分析仪器的微型化已经成为仪器分析发展的必然趋势,相应的微池微柱检测方法的开发是其发展的瓶颈问题。激光是微型分析仪器的理想光源,基于激光的微池微柱检测方法及检测器的研究已成为研究热点。毛细管电泳和微全分析系统的发展对微池微柱检测体系提出了更高的要求,理想的微池微柱检测方法既要适应微小体积样品的分析,又要具有灵敏度高,检测限低等优点。集快速准确、高通量、同时、同位、多信息等特点于一体的微体积检测系统是最具发展前景的检测技术之一。本文主要设计并搭建了基于激光热透镜,激光回射干涉和激光诱导荧光三种激光检测方法的一体化检测系统,在无分离的条件下利用该系统分析了实际样品中不同的组分,即对样品中性质和浓度皆不相同的组分进行“光分离”,以同时获得该组分的定性、定量信息,主要研究内容如下:1.依据激光热透镜,回射干涉和激光诱导荧光的理论和相关技术,分别搭建了双光束同轴激光热透镜检测系统,激光回射干涉检测系统和共焦型激光诱导荧光检测系统。根据各体系的影响因素,通过选取合适的光学元件,调整光路构型,对每个体系分别进行了条件优化。2.将激光诱导荧光检测和回射干涉两种检测方法有机结合,设计并搭建激光诱导荧光-回射干涉一体化的同位微柱检测系统。通过优化实验条件,使体系的效能最佳,并将该系统应用于对不同浓度的赤藓红和蔗糖二元混合物的定量分析中,其中激光诱导荧光用于检测溶液中的微量赤藓红,回射干涉用于检测溶液中高含量的蔗糖。在无分离的条件下,两种检测方法定量检测各自的目标物,实现“光分离”检测赤藓红和蔗糖。激光诱导荧光对赤藓红的检测限是0.03μg mL-1,回射干涉对蔗糖的检测限为0.39mg mL-1。采用外标法,在无需分离的条件下,同时实现了对实际样品棉花糖中赤藓红和蔗糖两种组分的定量检测,结果与标准液相色谱法所得结果一致。3.将激光热透镜和回射干涉两种检测方法有机结合,设计并搭建激光热透镜-回射干涉一体化同位检测系统。通过选择合适的光路构型,将回射干涉检测与双光束共轴同向激光热透镜检测结合起来。优化相关的实验参数,使两种检测模式的相互影响降到最低。在无分离的条件下,同时分析了日落黄和蔗糖的二元混合物。激光热透镜用于检测溶液中的微量日落黄,回射干涉用于检测蔗糖。两种检测方法可以很好的分析对应目标物,以标准溶液建立工作曲线。热透镜对日落黄的检测限是0.21μg mL-1,回射干涉对蔗糖的检测限是0.29mg mL-1。利用搭建的检测系统对市售芬达饮料中的日落黄和蔗糖进行了定量分析,在无分离的条件下,一次进样可以实现饮料中浓度相差千倍的日落黄和蔗糖的同时测定。4.在上述两个检测体系的基础上,将激光热透镜,激光诱导荧光和回射干涉三种检测方法联用,设计并搭建了激光热透镜,激光诱导荧光和回射干涉多功能一体化同位微柱检测系统,并针对每个检测方法进行了条件优化,使体系达到最佳状态。利用搭建的检测系统,在无分离的情况下,同时同位定性定量检测同一样本中浓度不同的日落黄,赤藓红和蔗糖三种组分,实现了三元混合物的“光分离”。激光诱导荧光对赤藓红的检测限是0.07μg mL-1,热透镜对日落黄的检测限是1.6μg mL-1,回射干涉对蔗糖的检测限是0.50mg mL-1。利用外标法,将体系用于实际样品棉花糖中三种成分的分析。在无分离的条件下,一次进样,可以同时同位检测棉花糖中浓度不同的赤藓红,日落黄和蔗糖,而且所需总样品量不足10μL。
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