ABO血型系统是临床输血医学和移植医学中最重要的血型系统,ABO血型的各种亚型造成临床血型鉴定困难,某些情况下可能使患者无法及时接受输血治疗或器官移植,延误治疗时机,甚至严重威胁患者生命。丙酮酸激酶缺乏症是一种常见的红细胞酶缺陷性疾病,主要引起慢性非球形红细胞溶血性贫血,为常染色体隐性遗传。PCR测序采用传统的Sanger测序法,其本身所具有的准确性高、易于标准化操作等优点使其被广泛的应用于临床检验诊断,大大提高了诊断的特异性和灵敏度。本研究主要是通过PCR测序技术对临床工作中遇到的ABO血型系统亚型及单基因遗传病给予基因诊断。通过收集先证者临床信息,对先证者临床表型进行分析,收集患者外周血进行DNA的提取,设计引物进行PCR扩增、测序,进而利用生物信息学软件对先证者基因型进行分析,实现PCR技术在临床检验诊断中的应用。在对一例B(A)亚型的研究中,发现该患者ABO基因存在多个变异,其第6外显子区存在261del和c.297A>G二处杂合变异,第7外显子区存在c.526C>G、c.640A>G、c.646T>A、c.657C>T、c.681G>A、c.703G>A、c.771C>T、c.796C>T、c.803G>C、c.829G>A、c.930G>A十一处杂合变异,以A101等位基因为标准序列进行比较,对照Blood Group Antigen Gene Mutation Database进行ABO等位基因突变分析,判断患者血型为B(A)04/O06血型。在对一例丙酮酸激酶缺乏症的研究中,发现先证者PKLR基因的7号外显子和9号外显子分别存在c.941T>C和c.1183G>C的复合杂合突变,先证者父亲和姐姐均为c.1183G>C杂合突变,先证者母亲为c.941T>C杂合突变,蛋白分析预测软件表明两个突变均引起蛋白结构的改变及酶活力的降低。