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目的:通过观察中药方剂清胰汤与移植同源骨髓间充质干细胞对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)所致肺损伤的影响,探讨二者协同保护ALI作用及其可能的机制。方法:Sprague-Dawley(SD)大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外分离、培养、扩增,观察记录大鼠BMSCs增殖规律及表面抗原CD34、CD45、CD29、CD90的表达。体外构建肺组织细胞直接共培养体系,脂多糖(LPS)诱发肺细胞损伤。取骨髓间充质干细胞完全培养基(Complete Condition Medium,CCM)、正常肺细胞培养基(Normal lung cell Condition Medium,NCM)、受损肺细胞培养基(Injury lung cell Condition Medium,ICM)、清胰汤含药血清培养基(Qingyi Decoction Condition Medium,QCM)及受损肺细胞和清胰汤含药血清培养基(Injury lung cell and Qingyi Decoction Condition Medium,IQCM)诱导BMSCs向肺组织细胞分化,免疫荧光细胞化学鉴定肺泡Ⅰ型细胞水通道蛋白-5(Aquaporins-5,AQP-5)、肺泡Ⅱ型细胞表面蛋白C(Surfactant Protein C,SP-C)表达。健康SD大鼠125只,随机分为假手术组(Sham operated group,Sham group,n=25)、急性胰腺炎组(severe acute pancreatitis model group,SAP group,n=25)、骨髓间充质干细胞组(Bone-Mesenchymal stem cells group,BMSCs group,n=25)、清胰汤组(Qingyi Decoction,QYD group,n=25),骨髓间充质干细胞加清胰汤组(Bone-Mesenchymal stem cells plus Qingyi Decoction group,BMSCs+QYD group,n=25)。采用改良的胆胰管逆行注射法制备重症急性胰腺炎肺损伤(SAP-ALI)模型。分别于造模后24小时,观察大鼠行为学特征变化及死亡率,肺组织病理学改变,肺湿/干重比值(Wet-Dry weight ratio,W/D),测定血清淀粉酶、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量,ELISA检测血清及肺组织匀浆Interleukin-1(IL-6)、Tumor Necrosis Factor(TNF-α)含量,PCR法鉴定肺泡细胞表面蛋白SP-A、SP-B、SP-C、水通道蛋白5(Aquaporins-5,AQP-5)mRNA表达,Western blotting法鉴定SP-C、AQP-5蛋白表达水平。结果:1、倒置光镜下观察大鼠BMSCs胞浆丰富,核胞比正常,呈长纤维细胞状,细胞排列成束状、螺旋状。流式细胞仪鉴定结果:BMSCs表面分子CD34-、CD45-,CD29+、CD90+。免疫荧光细胞化学检测:AQP-5、SP-C阳性细胞在ICM、IQCM中表达,在NCM、CCM、QCM组中均表达阴性,IQCM组BMSCs向肺泡Ⅰ型细胞、肺泡Ⅱ型细胞分化率均较ICM组显著性高(P<0.01)。2、与SAP组比较,给予清胰汤或BMSCs可降低重症急性胰腺炎大鼠的死亡率(p<0.05),显著减轻其肺组织的病理性损伤,降低血清淀粉酶活性、MDA、IL-6、TNF-α水平(p<0.05),上调SP-A、SP-B、SP-C及AQP-5的mRNA及SOD水平,SP-C及AQP-5蛋白的表达显著增高。炎症介质、氧化应激因子的减少及肺组织相关蛋白的增多在QYD+BMSCs组与QYD组及BMCSs组的差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:1.LPS体外损伤肺组织细胞能诱导大鼠BMSCs向肺泡Ⅰ、Ⅱ型细胞分化。2.清胰汤可能通过抑制过度失控的炎症反应,减少炎性介质的释放而改善肺内微环境,对急性肺损伤有一定的治疗作用。3.清胰汤能协同外源BMSCs参与肺损伤的治疗,促进大鼠BMSCs在肺损伤条件下向肺泡Ⅰ、Ⅱ型细胞分化,增强BMSCs的治疗效果。