<'60>Co-γ射线辐照百合结合组培的诱变育种基础研究

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本文采用<60>Co-γ射线辐照离体培养6d的东方百合鳞片,对鳞片离体诱导的不定芽在生长、生理等方面的损伤修复效应,从个体、细胞、染色体等水平上进行较全面的研究和分析。结果表明: (1)芽诱导阶段在本试验辐射剂量范围内,离体培养约6d的百合鳞片经<60>Co-γ射线辐照后存活率随剂量增大而呈现下降趋势。辐照显著抑制鳞片的出芽数和出芽率,随着培养时间的延长,抑制作用减小。 在不定芽诱导阶段,外层鳞片与中层鳞片表现出的辐射敏感性基本一致;培养基成分在一定程度上影响鳞片的辐射敏感性:鳞片辐射敏感性随培养时间变化明显,以辐照后鳞片的出芽率和出芽数为对照的50%为选择适宜辐射剂量的标准,培养28d时适宜辐射剂量约为1.0~2.0Gy,培养42d时适宜辐射剂量约为2.0Gy,培养70d时适宜辐射剂量为4.0Gy左右。 (2)芽增殖阶段辐照对第一次芽增殖的影响表现出明显抑制作用,但在第三次增殖过程中辐照对芽增殖的抑制作用消失。在芽增殖阶段,各生理指标的测定结果也表明,各辐照剂量引起的损伤修复作用在第三次芽增殖阶段仍然存在,但处于损伤修复作用的末期阶段。 POD同工酶酶带分析表明,不定芽诱导阶段离体培养条件(培养基、外植体)对酶带影响显著,这与POD酶活性方差分析结果一致。辐射剂量为2.0Gy和4.0Gy时POD酶谱带受辐照影响较大,酶带变化丰富。 (3)芽生根阶段在芽生根阶段,辐照效应在低剂量时对芽生长表现为刺激作用,在高剂量时表现为损伤效应。辐照显著抑制生根芽的芽高。生根芽辐照组MDA含量显著低于对照组,说明芽增殖阶段进行的膜损伤修复作用在生根阶段已经完成,辐射效应在芽生根阶段使生根芽对环境的适应能力增强。生根芽移栽阶段辐照组芽抗逆性比对照大幅度提高。辐照对百合移栽苗成活率的影响与芽诱导培养基、外植体关系密切。 (4)在辐射剂量为4.0Gy时,综合分析培养基、外植体与辐照的交互作用,培养基A2中鳞片芽在组培的各阶段生长情况要好于培养基A1中芽;中层鳞片芽在组培的各阶段生长情况要好于外层鳞片芽。说明,培养基A2更适于做东方百合鳞片辐射后诱导芽的培养基;中层鳞片比外层鳞片更适于做百合组培与辐射结合的诱变育种的辐射材料。
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