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单核细胞增多性李氏杆菌(Listeriamonocytogenes,LM)是一种重要的人畜共患病原菌,因其高死亡率及高致病率而被视为毒力最强的食源性病原菌,该菌是人和动物的常在菌,偶尔能穿越某些种类动物的肠道出现或是在无症状家畜动物的粪便中出现,此菌能穿越人及动物的肠道、血脑和胎盘三大屏障引起人及动物的李氏杆菌病,主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。 本项研究对从新疆部分地区健康绵羊、发病绵羊及周围环境(水源、青贮和乌鸦粪)分离出来的单核增多性李氏杆菌分离株进行了血清型与致病性的测定,以查明LM在新疆的主要血清型及致病性;同时用PCR-RFLP方法和多重PCR方法对8株LM分离株和实验室保存的参考菌株LM进行谱系分析和基因型分型,从而确定健康绵羊LM分离株、发病绵羊LM分离菌株及参考菌株LM在分子流行病学方面的相关性。 从564只健康绵羊的鼻腔和肛门分离到5株LM及实验室保存的3株发病绵羊LM分离株,对这8株LM分离株采用五重PCR方法进行血清型分型,鉴定出单核增多性李氏杆菌血清型为1/2a、4b,而大多数发病绵羊分离株与健康绵羊分离株单核细胞增多性李氏杆菌血清型均为1/2a,并与单核细胞增多性李氏杆菌参考菌株1/2a血清型相同,初步揭示本地导致绵羊发病的优势血清型为1/2a,绵羊发病可能为内源性感染,预示1/2a血清型和LM可能给食品安全带来隐患。 对8株LM分离株进行了小白鼠致病力检测、多重PCR谱系鉴定、血清型鉴定及InlA基因的PCR-RFLP分析,并与参考菌株对照。健康绵羊与临床发病绵羊单核增多性李氏杆菌分离株对小鼠具有相同的致病性;除1株临床分离株为血清型4b和谱系Ⅰ外,其余7株均为血清型1/2a和谱系Ⅱ;5株健康绵羊分离株的毒力基因InlA的PCR-RFLP基因型均为E型,而3株临床分离菌株则为C型或B型。两种不同来源单核增多性李氏杆菌在小鼠致病性,血清型及谱系上是具有一致性及相关性,但其毒力基因InlA存在多样性。初步揭示健康绵羊携带的LM可经内源性感染而发生李氏杆菌病,表明内源性感染是造成绵羊李氏杆菌病流行的一种传染方式。 本试验初步对LM在动物源性李氏杆菌病学研究提供了科学依据,并探索其多态性与致病性的相互关系,为其预防和控制提供依据。