8个米老排天然群体的遗传多样性研究

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米老排(Mytilaria laosensis Lecomte)为金缕梅科(Hamamelidaceae)壳菜果属(Mytilaria)的常绿乔木,是一种兼具材用、纤维用和生态保护等多用途的乡土树种。本文利用种实性状和新开发出的具有多态性的米老排SSR引物,从种实表型和SSR分子标记两个层次上研究了8个米老排天然群体的遗传多样性和遗传结构,为米老排种质资源的评价和利用提供了科学依据。主要结果如下:(1)8个米老排群体的6个种实性状在群体间和群体内变异丰富,各个性状在群体间和群体内差异均达到极显著水平,各性状的平均变异系数为13.90%,变异幅度为9.73%-18.39%;群体的种实表型分化系数为33.73%;种子的大小指数与种子的千粒重极显著正相关;除种子形态指数外,总体上,种子性状变异呈现出以经度为主的梯度规律性;基于群体间马氏距离进行的UPGMA聚类将8个米老排群体大致可以分为4类,其中广东封开(GDFK)和广西容县(GXRX)群体聚成一类,广西德保(GXDB)、广西防城(GXFC)与广西上思(GXSS)群体聚为一类,广西靖西(GXJX)与广西龙州(GXLZ)群体聚为一类,云南麻栗坡(YNML)群体独成一类。(2)以一个米老排样品的总DNA为模板开发米老排的SSR引物,经克隆测序共获得88条含有微卫星的序列,利用这些序列在Primer5.0软件中设计得到了51对SSR引物,用1.5%的琼脂糖凝胶电泳初步检测发现其中40对可在米老排中获得专一扩增,用6%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物的扩增效果,发现其中37对SSR引物能在8个米老排样本中扩增出多态性条带。(3)用26对米老排SSR引物在8个米老排群体的152个个体中共检测出190条等位片段,参试的SSR位点多态性较高,各SSR位点的NA均值为18.3,I值均值为1.1577,PIC的均值为0.7759,表明米老排供试群体具有较高的遗传多样性,8个米老排天然群体中,GXJX群体遗传多样性水平最高,GDFK群体的遗传多样性水平最低;利用SSR分子标记分析的群体间的遗传分化系数(Fst)为30.31%,AMOVA结果表明米老排群体内的变异占总变异的81.74%,说明米老排的变异主要存在于群体内;基于群体间Euclidean遗传距离进行的UPGMA聚类可以将8个米老排群体大致分为四类,GDFK、GXRX、YNML各成一类,GXFC、GXSS、GXLZ、GXDB、GXJX一起聚成一类。(4)利用TFPGA软件分别对8个米老排群体间的马氏距离、地理距离、Euclidean遗传距离进行Mantel相关性检验,得出马氏距离与地理距离显著相关(r=0.4594,p=0.02);Euclidean遗传距离与地理距离极显著相关(r=0.8389,p=0.001);马氏距离与Euclidean遗传距离间相关性未达到显著水平(r=0.2706,p=0.151);这说明米老排的遗传多样性会受地理分布广度的影响,种实表型变异除受基因控制外,还受环境因子的影响,有时可能环境因子的影响甚至起主要作用。
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