背景各种病因所致的慢性肝实质炎症、坏死可引起持续性纤维结缔组织增生,一旦超过纤维的降解即可导致肝脏纤维化,弥漫性肝纤维化同时伴有肝小叶结构的被破坏和肝再生结节则形成肝硬化。在临床上肝纤维化和肝硬化是连续的发展过程,二者不易截然分开。肝纤维化与早期肝硬化尚为慢性肝病的可逆阶段,因此肝纤维化与肝硬化的早期诊断与治疗有着非常重要的意义。目前诊断肝纤维化与肝硬化的主要方法是依靠病史、体征、化验及超声影像学检查,但由于肝脏代偿功能强,早期临床表现及肝功能检查多为正常。中晚期肝硬化的二维超声图像可清晰地显示肝脏的主要病理改变,但缺乏声学定量分析,受检查者主观影响较大。彩色多普勒血流显像对肝硬化的诊断有重要参考价值,但在肝纤维化与肝硬化早期的表现缺乏特异性。肝硬化早期超声表现与早期酒精性肝病、早期脂肪肝等肝脏弥漫性病变不易区别,鉴别诊断有赖于肝脏穿刺活检,但这种有创性诊断方法尚未得到患者的普遍接受。声学造影技术的发展使定量评价肝脏血流灌注与微循环的改变成为可能,为肝纤维化与肝硬化的早期诊断提供了新的方法。国外学者报告正常人和肝硬化患者声学造影后肝静脉多普勒时间强度曲线有很大差异,其敏感性和特异性高达96%以上,认为造影剂通过肝脏时间可作为诊断肝硬化的无创性诊断方法,但病例数少,未作深入的机理探讨和实验研究。计算机纹理分析方法是一门新兴的边缘学科,它正在向包括影像医学在内的各个领域渗透,不断有学者运用计算机纹理分析的原理和方法进行实质性脏器超声纹理定量的探索,为体内组织定量分析提供了一种新的有力工具。近年来国内外学者对弥漫性肝病的纹理改变进行了研究,发现纹理改变能够反映肝脏结构的改变,但采取何种纹理分析法以及纹理参数的选择有待进一步研究。目的:使用自制的氟碳类造影剂,对正常大鼠和不同阶段肝硬化模型大鼠进行肝脏声学造影,探讨声学造影后造影剂通过肝脏时间与肝实质时间-强度曲线对诊断肝纤维化<WP=11>和肝硬化的可行性,并使用邻接点算法软件对以上对象肝脏实质超声纹理进行分析,探讨邻接点算法诊断肝纤维化与肝硬化的可行性,以及在SonoCT条件下能否提高纹理分析能力。方法:研究对象为80只大鼠,随机分为5组,每组16只。其中4组首次皮下注射纯四氯化碳5 ml/kg,以后皮下注射50%四氯化碳橄榄油溶剂3 ml/kg一周两次,20%酒精为唯一饮料,高脂饮食分别为6周、8周、10周、12周;对照组皮下注射生理盐水3 ml/kg,正常饮食饮水。经髂静脉声学造影,观察造影剂在正常大鼠和肝纤维化、肝硬化模型大鼠肝脏通过时间变化的情况。在正常对照组与建立模型各组中分别经静脉声学造影,观察指标:下腔静脉内造影剂出现时间;肝静脉内造影剂出现时间;校正后肝静脉内造影剂出现时间(造影剂穿过肝脏时间即前两者相减之差值),比较各组参数的变化。声学造影后肝脏实质时间-强度曲线研究肝纤维化与肝硬化不同时期血流灌注改变情况。采集造影后约2分钟内的肝脏实质二维灰阶动态图像,以视频分析法对比造影前后肝脏实质灰度值的变化,测量指标:肝实质的峰值强度(PI)、峰值时间(PT)、峰值减半时间(HT)、曲线下降斜率(DS)、曲线下面积(AUC)和造影剂平均渡越时间(MTT)。采用高频探头扫查、邻接点算法对正常大鼠与肝纤维化、肝硬化大鼠肝脏二维声像图进行计算机纹理分析。观察指标:测量并比较正常对照组与肝硬化不同时期各组大鼠肝脏的相对不均匀度值(HSR),比较基波条件和SonoCT条件下相对不均匀度值的变化。实验完成后将大鼠处死,取血以放射免疫法测量血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C),并比较各组间的变化。取肝组织行HE染色、病理切片检查,了解肝组织病理改变与模型建立情况。实验结果指标均采用配对T检验进行统计学分析。取肝脏组织块行透射电镜检查,了解肝组织超微结构的变化。结果:1. 经皮下注射四氯化碳建立大鼠肝纤维化与肝硬化模型,病理检查结果显示:注射四氯化碳6周时,大鼠肝细胞变性坏死,汇管区纤维结缔组织增生明显;8周时,肝脏纤维结缔组织广泛增生,肝索排列紊乱,有少量假小叶形成:10～12周时,肝脏内广泛假小叶形成。 <WP=12>2. 肝纤维化与肝硬化大鼠的造影剂肝脏平均通过时间较正常大鼠明显减小,且肝纤维化、早期肝硬化阶段与中晚期肝硬化阶段之间差异显著(P<0.01)。3. 肝脏造影后时间-强度曲线参数比较:随着肝纤维化与肝硬化程度的加重,峰值强度(PI)、峰值时间(TP)及曲线下降斜率(DS)逐渐下降,峰值减半时间(HT)逐渐上升,差异显著(P<0.05),而曲线下面积(AUC)和平均渡越时间(MTT)无显著变化。4. 邻接点算法测得相对不均匀度(HSR)比较:肝纤维化与肝硬化大鼠肝脏纹理HSR较正常大鼠明显升高(P<0.01);基波条件下与SonoCT条件下的HSR测值比较有显著差异(P<0.01)。5. 随着肝纤维化与肝硬化程度的加重,血清学指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)呈动态升高。6. 肝组织透射电镜检查结果显示:Disse间隙与细胞间隙中胶原纤维增生,基底膜形成,有肝窦毛细血管化现象。结论:1. 皮下注射四氯化碳、酒精溶液为唯一饮料以及高脂饮食可以成功建立大鼠肝纤维化与肝硬化的动