目的:1.分析HPVE6/E7mRNA在宫颈组织学病理不同等级中的表达差异性;2.研究HPVE6/E7mRNA在绝经期女性中对于高级别子宫颈上皮内瘤变(HSIL)及宫颈癌的应用价值和临床效能;3.宫颈薄层液基细胞学(TCT)联合HPVE6/E7mRNA检测在绝经期女性对高级别子宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中较单独检测的优势性研究;4.绝经期女性阴道微生态环境因素与HPV持续性感染的相关性。方法:选取2017.2-2018.8于大连市妇幼保健院暨大连医科大学附属大连市妇产医院因宫颈病变就诊,同时行TCT和HPVE6/E7mRNA检查并有最终宫颈组织病理学(宫颈组织活检或锥切后的病理最高等级为最终宫颈组织病理学结果)诊断结果的绝经期女性429例做回顾性分析。对不同病理等级中HPVE6/E7mRNA的阳性率和病毒拷贝情况分别进行组间对比和Spearman秩相关分析;对HPVE6/E7mRNA在低级别和高级别子宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中相关性趋势做Logist回归分析。ROC曲线做HPVE6/E7mRNA临床效能评估。计算HPVE6/E7mRNA、TCT、联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,通过单因素方差和Kappa Coefficient对各种检测方法进行组间比较和临床一致性分析。收集HPVE6/E7mRNA 阳性的绝经期女性阴道炎症情况,通过相关系数(r)分析阴道微生态内环境对HPV持续性感染是否相关。统计学方法用SPSS19.0软件进行数据分析统计,计数单位组间比较用X2。非正态分布的计量资料以M(Q1,Q2)表示,其组间比较用Kruskal-Wallis H检验,两组变量相关性用Spearman秩相关;检测手段效能用ROC曲线表达;正态分布组间比较用单因素方差分析;临床诊断一致性用Kappa Coefficient。P<0.05为统计学有意义。结果:429例绝经期女性,正常宫颈组织病理中HPVE6/E7mRNA的阳性率为28.68%;LSIL 中 HPVE6/E7mRNA 的阳性率为 82.00%;HSIL 中的阳性率 93.29%;宫颈浸润癌中HPVE6/E7mRNA的阳性率98.04%。宫颈组织病理等级越高,HPVE6/E7mRNA的阳性率越高(X2=173.06,P<0.05,差异有统计学意义)。HPVE6/E7mRNA阳性患者拷贝表达情况分析中,病理等级正常者表达为9.7(3.9,11);LSIL 表达为 10.9(9.7,13);HSIL 表达为 21.2(19.6,24);宫颈浸润癌表达为28.9(23.5,31.3)。不同病理等级中,HPVE6/E7mRNA的拷贝表达情况差异性显著,并且成正相关性(Kruskal Wallis statistic 为236.55,Kruskal Wallis P<0.0001,差异有统计学意义;秩相关性Spearman correlation为0.86,Spearman P<0.0001)。对HPVE6/E7mRNA在病理HSIL以下和HSIL及以上病变进行Logist回归分析,OR估计值(EXP(B))=2.522,HPVE6/E7mRNA表达量数据每增加一个单位,相应的病理改变数值为2.522倍,表明拷贝量越大,病理改变越有向HSIL及以上病变发展的趋势。HPVE6/E7mRNA的ROC曲线分析结果显示,AUC=0.993,接近于1。以宫颈组织病理学结果为金标准,计算出TCT检测的灵敏度为90.50%,特异度为34.50%,阳性预测值为54.68%,阴性预测值为80.61%(X2=35.721;P<0.05);HPVE6/E7mRNA检测的灵敏度为94.50%,特异度为48.03%,阳性预测值为61.36%,阴性预测值为90.91%(X2=94.770;P<0.05);联合检测的灵敏度为86%,特异度为57.60%,阳性预测值为63.94%,阴性预测值为82.50%(X 2=68.817;P<0.05)。通过单因素方差分析,三种检测方法在灵敏度、阳性预测值、阴性预测值上差异无统计学意义(F=3.281;2.252;2.214,P>0.05)。在特异度上三种检测方法的组间差异显著(F=10.039,P<0.05),而联合筛查特异度高于TCT和 HPVE6/E7mRNA 单独检测。通过 Kappa Coefficient,HPVE6/E7mRNA 0.41(0.34-0.49),TCT 0.24(0.17-0.31),联合检测 0.43(0.35-0.51),在与最终病理结果比较的一致性上,联合检测优于其他两项单独检测。HPV E6/E7 mRNA阳性时阴道炎症发生率(12.4%)高于HPV E6/E7 mRNA阴性时阴道炎症发生率(4.9%),差异有统计学意义(X2=8.206,P<0.05).两者的相关系数(r)为0.119,P<0.05,两者呈弱相关。结论:1.绝经期妇女中,在高级别子宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中HPVE6/E7mRNA的表达更加显著。2.绝经期妇女中HPVE6/E7mRNA在检测高级别宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中,临床应用效能较高;3.在绝经期妇女中,联合检测在与病理诊断金标准比较上,一致性高于单独HPVE6/E7mRNA和TCT单独检测,并且联合筛查可提高HPVE6/E7mRNA或TCT单独检测的特异度,可提升疾病检测的准确率,减少误诊和过度诊疗,可用于绝经期女性高级别子宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的首选检测手段。4.绝经期女性宫颈HPV的持续性感染可能与阴道炎症有关。