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经导管血管栓塞术（Transcatheter arterial embolization, TAE）是在X射线透视下，经导管向靶血管内注入或送入栓塞物质，使血管闭塞从而达到预期治疗目的的技术。它通过阻塞血管血流，减少病灶或身体某个特定部位的血液供给达到治疗疾病目的。该技术具有微创性、全程影像引导和选择性靶血管插管技术，使得栓塞的准确性和可控性大大增强，成为革命性的临床治疗方法。微球因其栓塞效果好、对特定组织器官的靶向性高、可以与化疗药结合可缓释药物等优点，从而受到越来越多的关注，是目前常见的栓塞载体。壳聚糖（Chitosan）是甲壳质脱乙酰基后得到的一种天然阳离子多糖，化学名称为β-（1,4）-2-氨基-2-脱氧-D-葡聚糖。具有良好的生物相容性、生物可降解性、天然无毒、抑菌性、抗肿瘤、增强免疫及抗氧化活性等，在医药、食品、农业、生化、化工、环保等诸多领域都有一定的应用价值。近年来以壳聚糖及其衍生物为原料的有关栓塞剂一直是研究的热点，其既具有自身优良的生物学活性，又可以包载多种药物，起到物理栓塞和化学治疗双重作用。本文以壳聚糖为原料，采用乳化-交联法制备壳聚糖微球（CMs）及乙酰化微球（ACMs），检测其理化性质及生物相容性，利用乙酰化后的微球进行兔耳模拟栓塞实验检测栓塞效果，为临床应用奠定基础。采用O/W乳化交联法对现有的壳聚糖制备微球，通过单因素分析法和响应面分析法综合考察了壳聚糖浓度、乙酸浓度、Span80量、甲苯量、乳化转速、乳化时间、甲醛量和交联时间对微球制备的影响，通过Plackett-Burman实验设计、最陡爬坡实验及Box-Behnken实验设计分析各因素的主次效应、优化各因素水平，多次实验后得出微球制备工艺为：2%（w/v）壳聚糖用1.7%（v/v）的醋酸溶解，取100ml加入含7ml Span80和2ml tween-60的488ml甲苯中，1100rpm搅拌60min充分乳化，然后加入10ml甲醛溶液再搅拌60min进行固定，最后完成微球的制备。经重复实验得到微球实验值（8.03g）和理论值（7.93g）相差不大，所得微球表面光滑、球形完整、形状规则。经乙酰化CMs得到乙酰化壳聚糖微球（ACMs），微球表面光滑、球形完整，分散良好。FT-IR显示ACMs在1595cm-1处出现乙酰氨基特征吸收峰。壳聚糖、CMs、ACMs的脱乙酰度分别为90.57%、84.83%和20.92%，说明形成微球后有5.7%的氨基发生交联反应，之后又有63.9%的氨基被乙酰化。CMs溶胀率与pH值呈反比，ACMs溶胀率受pH值影响较小。同时，两种微球溶胀率受环境温度影响都很大，随着温度升高而增加。微球热稳定性良好，在121℃、150kPa加热1h无明显变化，室温静置3个月后，形态依然完整。ACMs在溶菌酶的作用下酶解速度大于CMs，8周后两者质量分别下降了58.1%和40.7%，降解后的微球表面凹凸不平、出现空腔。两种微球均能吸附BSA，由于CMs上氨基更多，所以蛋白吸附量比ACMs的大，达到吸附平衡时间也长。ACMs在低浓度（10mg/ml）和高浓度（50mg/ml）时溶血率均小于5%，而CMs在高浓度时明显溶血；ACMs所诱导的血栓形成反应较小，血栓量明显少于CMs，结果说明ACMs具有良好的血液相容性。MTT法比较了两种微球对胎鼠成纤维细胞（MEFs）的毒性，MEFs细胞能在稍小粒径（132μm、260μm）的两种微球上生长良好，而在大粒径（429μm）上无法生长，MEFs在CMs上的增殖率随着孵育时间的延长而降低，但在ACMs上增殖率随着孵育时间的延长而上升。通过蛋白吸附、血液相容性、细胞毒性实验表明ACMs具更好的血液相容性和细胞相容性。对两种微球进行体内生物安全性评价。材料浸提液无皮肤致敏性和刺激性，对兔眼角膜也无刺激性。以高剂量（0.5ml/10g）通过尾静脉注射比腹腔注射对动物的刺激略大，注射后24h时体重下降，但之后恢复正常，而腹腔注射对小鼠无影响，表明材料浸提液无潜在急毒性。将微球植入大鼠肌肉后，术后3d、7d、14d时对大鼠肝、肾功能无影响；但植入炎症反应导致WBC水平升高（P<0.05），7d后之后恢复正常；微球在体内逐渐被降解，没有引起明显的组织排异反应，有良好的组织相容性。ACMs栓塞兔耳动脉3d后，兔耳发炎水肿，耳尖由于血管被堵出现发黑、结痂现象；栓塞后7d，兔耳消肿，耳尖明显发黑、结痂、缺血性坏死；栓塞15d，耳尖部位小动脉萎缩消失，周围组织干性坏死，部分发生脱落，与坏死组织交界的边缘表皮萎缩增厚；结果表明ACMs有明显栓塞效果。检测了盐酸阿霉素（ADM HCl）载药微球的包封率、载药量及体外缓释行为。两种微球包封率和载药量分别为54.8±1.23%、11.1±0.61%，由于脱水作用，导致未干燥的CMs的药物包封率和载药量均高于干燥后的微球（分别为62.53%、13.67%）。载药微球体外释药研究表明，两种载药微球在pH4.0介质中缓释率要在比在pH7.2介质中大，且ACMs缓释效果优于CMs，存在明显缓释作用。实验发现壳聚糖微球，尤其是乙酰化壳聚糖微球具有良好的血液相容性、细胞相容性、组织相容性，生物安全性高，栓塞效果明显，可以作为临床上潜在的血管栓塞材料。