蜂胶黄酮分离纯化和生物学活性的研究

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蜂胶(Propohs)是蜜蜂从植物芽孢和枝条上采集的树脂状分泌物并混入蜜蜂上颚腺分泌液和蜂蜡等而形成的复杂物质,其主要活性成分包括黄酮类、萜烯类、有机酸、芳香醛、酯类及多种氨基酸、酶、维生素、矿物质等。蜂胶具有多种保健和辅助治疗功能,它可以抗衰老、抗氧化、止神经痛、对治疗肌肉硬结肿块等疾病也有一定的作用。近年来在全球范围内引起广泛关注。本文以蜂胶为研究对象,对其中黄酮类化合物的最佳提取工艺进行了研究,并对提取的蜂胶总黄酮进行分离纯化,对纯化后的蜂胶黄酮提取物进行抗氧化和抑菌功效的研究。试验结论如下:1.乙醇浸提法,通过单因素的分析和根据中心组合(Box-Behnken)试验,结果表明,提取时间10min、乙醇浓度82%、提取温度72℃、该条件下的蜂胶黄酮得率率为22.88%。2.超声波提取法,通过单因素的分析和根据中心组合(Box-Behnken)试验,结果表明,超声时间27min、超声功率220w、乙醇浓度73%、提取温度66℃、该条件下的蜂胶黄酮得率为23.38%。3.微波提取法,通过单因素的分析和根据中心组合(Box-Behnken)试验,结果表明,微波时间为70s、微波功率为282w、乙醇浓度为80%、提取温度为77℃,在此条件下,蜂胶总黄酮得率为25.41%。4.对蜂胶黄酮进行分离纯化。实验选用大孔树脂为吸附材料对蜂胶黄酮分离纯化,测定不同浓度梯度的洗脱液中蜂胶黄酮的含量。结果显示,先用水洗去水溶性杂质,然后用70%乙醇水体系作为流动相可以将蜂胶黄酮与其他组分很好的分离开来,从而达到分离纯化的目的。5.对蜂胶黄酮提取物进行了体外抗氧化能力的测定,可知蜂胶黄酮具有一定的抗氧化活性。试验结果显示,当精制蜂胶黄酮浓度达到0.25mg/mL时对超氧阴离子其清除率达98.3%;当精制蜂胶黄酮提取物浓度达0.05mg/mL时,对羟自由基的清除率达98.9%;对DPPH清除率高达96.9%;对NO2-离子的清除率97.9%。6.用纯化后的蜂胶黄酮提取物进行抑菌实验。由试验结果可知,蜂胶黄酮对食品中常见的4种致腐菌有一定抑菌效果。试验结果表明其对几种菌种的抑菌能力大小依次为为:啤酒酵母>金黄色葡萄>大肠杆菌>沙门氏菌。
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