【摘 要】
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MYB转录因子家族作为植物最大的转录因子家族之一,参与植物的整个生长发育过程,在植物应答外界逆境胁迫中非常重要。本研究以小黑杨(Populus simsonii×Pnigra)为材料,从本实
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MYB转录因子家族作为植物最大的转录因子家族之一,参与植物的整个生长发育过程,在植物应答外界逆境胁迫中非常重要。本研究以小黑杨(Populus simsonii×Pnigra)为材料,从本实验室前期筛选出的耐盐基因中,选择PsnMYB108基因作为研究对象进行基因功能分析。结果如下:从小黑杨叶片中克隆出954bp的PsnMYB108基因的cDNA片段,其编码的蛋白含有317个氨基酸,属于不稳定的亲水蛋白,不存在信号肽,不具跨膜能力,含两个MYB家族保守结构域。系统进化树表明,小黑杨PsnMYB108蛋白与毛果杨MYB108蛋白及胡杨、榴莲、茶花、银白杨、向日葵的MYB108-like蛋白具有较近的遗传距离。PsnMYB108启动子中含有与植物抗逆相关的顺式作用元件。亚细胞定位结果表明,PsnMYB108蛋白定位于细胞核中。PsnMYB108基因表达具有组织特异性,并受胁迫诱导表达。PsnMYB108基因在根中的相对表达水平明显比在茎和叶中表达水平高。在盐胁迫下,PsnMYB108基因表现上调表达。表明PsnMYB108基因可能与植物应答高盐胁迫相关。将PsnMYB108基因 ORF 分成 1-951bp、1-315bp、316-951bp、1-531bp、532-951bp、1-654bp、655-951bp、655-858bp、859-951bp 片段,构建pGBKT7-PsnMYB108(不同长度)表达载体并转化酵母菌株Y2H,结果表明PsnMYB108转录因子具有自激活活性,且自激活结构域位于C端的99aa内。构建pROKII-PsnMYB108植物表达载体,培育转基因烟草,分析转PsnMYB108基因烟草的生理指标。结果表明,在盐胁迫条件下,转PsnMYB108基因烟草种子的萌发率、幼苗的根长、SOD活性、POD活性均明显高于野生型,MDA含量、相对电导率均低于野生型。试验表明,PsnMYB108基因能够增强烟草的抗氧化能力、减少烟草细胞膜的损伤,提高烟草的耐盐能力。
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