帕金森氏病是一种常见的中老年神经退行性疾病,常引起运动障碍,如动作迟缓、静止震颤以及姿势异常等。病理表现为多巴胺能神经元减少和路易小体的形成。目前常用的治疗药物有左旋多巴类制剂、B型单胺氧化酶（B-type monoamine oxidase,MAO-B）抑制剂、多巴胺受体激动剂以及神经修复制剂等,但这些药物仅能改善症状,并不能完全治愈。而大量研究显示,线粒体功能障碍与帕金森氏病的发病有密切联系。众所周知,线粒体是真核细胞重要的细胞器,参与多项细胞活动,而且具有自己独特的遗传物质,当线粒体功能发生障碍时会导致许多的人类疾病。近年来有研究发现将功能正常的线粒体转运至线粒体功能受损的受体细胞后,可以修复受体细胞的线粒体功能,恢复细胞活力。所以我们将提取纯化的正常小鼠肝脏线粒体与帕金森氏病模型细胞共同孵育,来研究其对帕金森氏病模型细胞的影响。本实验主要通过将帕金森氏病模型细胞与正常昆明小鼠肝线粒体共孵育,证明外源线粒体可以进入人神经母瘤细胞（human neuroblastoma cells,SH-SY5Y）,并能够减轻1-甲基-4-苯基吡啶离子（1-methyl-4-phenyl-pyridineion,MPP+）对SH-SY5Y细胞的损伤,恢复细胞活力。实验主要分为三部分进行,第一部分:分别用质粒DsRed2-Mito和ECFP-Mito转染人肝癌细胞（liver hepatocellular cells,HepG2）,用以标记线粒体。为得到稳定表达的细胞株,又采用慢病毒转染ECFP-Mito,再将稳定表达的肝癌细胞中荧光标记的线粒体提取出来,并与SH-SY5Y细胞共孵育,在共聚焦显微镜下观察,证明了外源线粒体可以进入SH-SY5Y细胞。第二部分:提取正常昆明小鼠肝脏的线粒体,激光粒度仪测定线粒体粒径,用电子透射显微镜观察线粒体的内部构造。并分别用詹姆斯绿B和MitoTrackr Red CMXRos染色线粒体,在荧光显微镜和油镜下观察线粒体形态。运用线粒体膜电位检测探针JC-1,以及不同浓度CaCl₂分别在荧光分光光度计和流式细胞仪下检测提取纯化的线粒体的膜电位以及膜完整性。第三部分:首先,用阿尔玛蓝检测外源线粒体与正常SH-SY5Y细胞共孵育后细胞活力的变化以及细胞的生存曲线。再用MPP+（常用于制备帕金森氏病细胞模型）处理SH-SY5Y细胞,构建体外帕金森氏病细胞模型。再将小鼠肝脏线粒体与帕金森氏病的模型细胞共孵育,用阿尔玛蓝检测到加入线粒体后细胞活力明显增强,透射电镜的结果显示MPP+处理后SH-SY5Y细胞线粒体出现肿胀,空泡和破裂,而加入线粒体孵育三天后,细胞内线粒体形态大部分显示正常,而且细胞凋亡坏死率降低,测定细胞内线粒体功能发现,细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量下降、腺嘌呤核苷三磷酸（adenosine triphosphate,ATP）含量增加、线粒体膜电位恢复。本实验结果显示正常昆明小鼠肝脏线粒体可以进入SH-SY5Y细胞,从小鼠肝脏中提取的线粒体保持良好的活性,并对帕金森氏病模型细胞具有一定的治疗作用,为帕金森氏病的治疗提供了一种新思路。