【摘 要】
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目的探讨lncRNA loc105377478在纳米氧化钕致人支气管上皮细胞（16HBE）炎症反应中作用与机制。方法不同剂量纳米氧化钕暴露16HBE细胞24h、48h和72h后,分别采用ELISA和q RT-PCR法检测IL-6和IL-8的表达,使用CCK8检测细胞活力,ROS检测细胞内活性氧水平,LDH检测细胞膜完整性。微阵列检测lnc RNA表达谱差异性表达后,挑选5个上调和5个下调的基因进行
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目的探讨lncRNA loc105377478在纳米氧化钕致人支气管上皮细胞（16HBE）炎症反应中作用与机制。方法不同剂量纳米氧化钕暴露16HBE细胞24h、48h和72h后,分别采用ELISA和q RT-PCR法检测IL-6和IL-8的表达,使用CCK8检测细胞活力,ROS检测细胞内活性氧水平,LDH检测细胞膜完整性。微阵列检测lnc RNA表达谱差异性表达后,挑选5个上调和5个下调的基因进行q RT-PCR验证。Lnc RNA loc105377478沉默/过表达后,采用ELISA和q RT-PCR法检测IL-6和IL-8的表达,及检测ROS水平与释放量。纳米氧化钕暴露16HBE细胞48h后,采用western blot法检测细胞中ADIPOR1、p-IκB、p-p65蛋白的表达。Lnc RNA loc105377478沉默/过表达后,采用Western blot法分别检测氧化钕暴露16HBE细胞中ADIPOR1、p-IκB、p-p65蛋白的表达。ELISA法检测NF-κB通路抑制后lnc RNA loc105377478沉默/过表达与纳米氧化钕共同处理16HBE细胞的IL-6、IL-8的表达。结果5-80μg/ml纳米氧化钕处理16HBE细胞后细胞活力无明显影响（p?0.05）,120-320μg/ml的纳米氧化钕染毒16HBE细胞后细胞活力明显下降（p<0.01）。5-80μg/ml纳米氧化钕处理16HBE细胞后细胞膜完整性明显降低（p<0.01）,IL-6和IL-8表达明显增加（p<0.01）。10μg/ml纳米氧化钕处理16HBE细胞进行RNA微阵列（lnc RNA、m RNA）和q RT-PCR检测发现lnc RNA loc105377478稳定高表达（p<0.01）。功能实验研究发现,敲低lnc RNA loc105377478后,纳米氧化钕处理16HBE细胞,IL-6和IL-8表达明显降低（p<0.05）,过表达lnc RNA loc105377478后,IL-6和IL-8表达增加（p<0.05）。通过生物信息学分析,ADIPOR1可能作为lnc RNA下游靶蛋白,ADIPOR1沉默后可导致NF-κB通路激活（p<0.05）,ADIPOR1沉默与lnc RNA-ASOs共转染后可逆转对NF-κB通路抑制作用（p<0.05）。结论纳米氧化钕可以引起16HBE细胞炎症反应。lnc RNA loc105377478在纳米氧化钕致16HBE细胞炎症中表达明显上调,lnc RNA loc105377478可能通过调控ADIPOR1/NF-κB促进IL-6和IL-8表达。
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