白蜡虫在温度胁迫下和不同虫态中hsps表达动态分析以及ep-hsp20、ep-hsp70 cDNA全长克隆

来源 :中国林业科学研究院 | 被引量 : 2次 | 上传用户:nan13519927
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
白蜡虫(EriceruspelaChavanness)对极端高温和低温具有非同寻常的耐受能力,这对白蜡虫种群分布和白蜡生产具有重要意义。为研究热激蛋白(heatshockprotein,Hsp)与白蜡虫适应极端温度以及白蜡虫发育的相关性,本研究采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术,在本实验室白蜡虫转录组中7个不同的hsps(hsp21.5,hsp21.7,hsp40,hsp60,hsp70,hsc70,hsp90)基因序列的基础上,选择白蜡虫雌成虫和二龄雄虫2个有代表性的虫态,分析高温和低温胁迫下hsps的基因表达变化,以及雌雄白蜡虫不同虫态hsps的基因表达动态;并选择对温度胁迫和在不同虫态中变化较为显著的hsp20家族成员(hsp21.5和hsp21.7)和hsp70家族成员(hsp70和hsc70),进行了全长基因克隆。研究获得以下主要结果:   (1)hsp21.7、hsp60、hsp70和hsp90对白蜡虫高、低温胁迫敏感   高温:①雌成虫。在白蜡虫雌成虫中,7个hsps均能被高温不同程度地诱导,其中hsp21.7和hsp70基因表达显著上调,hsp90基因的表达量也有显著增加。②二龄雄虫。在白蜡虫二龄雄虫中,hsp90和hsp21.7的mRNA的上调显著,而hsp21.5和hsc70的mRNA却是下调表达的。   低温:雌成虫。在白蜡虫雌成虫中,除hsp40外,其它6个hsps均能被低温不同程度地诱导,其中,hsp21.5和hsp70对低温诱导更为敏感。   (2)hsp21.5、hsp40、hsp60、hsp70和hsc70与雌雄白蜡虫的发育调节相关   ①在白蜡虫雌虫中,除了hsp21.7和hsp90外,其它5个hsps在雌虫的发育中均有上调表达。hsp21.5的mRNA表达水平在二龄幼虫期达到最大;hsp40、hsp60和hsp70在成虫期有明显上调表达;hsc70在一龄幼虫期有显著的上调表达。②在白蜡虫雄虫中,所检测的7个hsps均有上调表达,其中hsp21.5的mRNA表达量在成虫期显著上调;而其它6个hsps的mRNA水平均是在二龄幼虫期为最高。   (3)白蜡虫hsp20的序列特征   ep-hsp21.5和ep-hsp21.7的cDNA全长分别为997和873bp,开放阅读框(openingreadingframes,ORFs)为570和564bp,推测编码189和187个氨基酸,蛋白质的分子量分别为21.5和21.7kDa,均含有保守的α-晶体结构域,这表明它们都是小分子Hsp(sHsp)。在系统发育分析中,ep-Hsp21.5和ep-Hsp21.7分别聚为两支,ep-Hsp21.5与同源性(orthologous)sHsp聚在一起;而ep-Hsp21.7和物种特异性(species-specific)sHsp聚在一起。   (4)白蜡虫hsp70的序列特征   ep-hsp70和ep-hsc70的cDNA的全长分别为2355和2417bp,ORFs分别为1908和1962bp,推测编码635和653个氨基酸,相对分子量分别为69.8和71.6kDa,均含有Hsp70家族的三个特征序列。在系统发育分析中,ep-Hsp70与诱导型Hsp70聚为一支,ep-Hsc70与组成型Hsc70聚为一支,且两者均与细胞质Hsp70聚在一起。hsc70基因组DNA序列有4个内含子,分别为1139、255、514和94bp。第一个内含子最长,位于5UTR;其余3个内含子均位于编码区内。   在白蜡虫中,诱导型hsps,如ep-hsp21.7和ep-hsp70,参与温度胁迫;ep-hsp21.5和ep-hsc70是组成型hsps,参与白蜡虫的发育调节,这与大部分研究结果类似。而在极端温度下,组成型hsp也会参与白蜡虫的温度耐受。
其他文献
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
土壤抗剪强度与土壤侵蚀关系非常密切,是表征土壤抗侵蚀性能,土体破坏、埂坎稳定性重要力学指标,同时也是土壤耕性的重要参数。本文以江西进贤、云南马龙、广西来宾红壤坡耕
青冈栋(Cyclobalanopsipglauca)属于壳斗科、栋属,常绿乔木树种,其生态适应性相对较强,是优良的珍贵用材树种,同时也是我国亚热带地区东部湿润常绿阔叶林中的主要优势树种,青
维生素E是人体必需的脂溶性维生素,只能在光合自养生物中合成,核桃(Juglansregia L.)坚果是重要的天然维生素E源。本研究以早实核桃‘香玲’胚为材料,克隆了维生素E生物合成途径的
近年来,随着城市化进程的不断推进,人们把关注度逐步倾向中心镇在城市化进程中的地位和作用。全国各地的政府陆续制定了中心镇的发展战略,积极倡导中心镇的建设。把中心镇培育成