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背景与目的:遗传性长QT综合征(hereditary QT syndrome,hLQTS)是一组因心肌细胞膜上离子通道蛋白的基因突变而导致相应离子通道功能障碍所引起的临床综合征,临床上主要以QT间期延长、ST-T易变、室性心动过速(Ventricular Tachycardia,VT)、尖端扭转性室性心动过速(Torsade de points,TDP)以及发作性晕厥、SCD等为特征。hLQTS死亡率较高,是在儿童和青少年猝死发生事件中的一个重要致死原因。研究表明,蛋白质转运异常是重要致病原因,基因突变致突变蛋白滞留内质网,不能转运到细胞膜上形成成熟的、有功能的HERG通道,从而导致hLQTS。分子伴侣在蛋白质正确折叠转运过程中发挥了重要作用,而具体发挥何等作用以及能否通过调控分子伴侣的表达从而产生对HERG蛋白的转运尚不得而知。本课题主要研究是否可以通过对分子伴侣Calnexin(CNX)表达水平的调控从而纠正HERG-A561V突变蛋白转运障碍,并明确CNX在HERG-A561V突变蛋白折叠转运异常中的具体作用,从分子层面为LQTS的治疗提供一个新的研究方向。方法:分别转染pcDNA3-hERG,pcDNA3-A561V-hERG和pcDNA3-A561VhERG,pcDNA3-hERG质粒至HEK-293细胞构建WT(野生)、HERG-A561V(突变)和WT/HERG-A561V(杂合)三种细胞模型;继而分别转染CNX过表达质粒及shRNA-CNX减表达质粒至各组细胞模型中,Western Bolt进一步检测各组转染前后hERG蛋白表达变化情况。结果:转染CNX过表达质粒后,野生型、突变型细胞膜上成熟HERG蛋白(155KDa)表达没有明显差异性改变,而在杂合型细胞中,CNX的过表达使155KDa条带表达较对照组稍有增多;转染shRNA-CNX减表达质粒后,我们则发现,野生型HERG的表达较对照组没有表达差异,而在突变组及杂合组细胞模型中,155KDa条带较对照组增加,且以杂合组增加的更为明显。结论:分子伴侣CNX在HERG-A561V突变所致的蛋白质折叠转运过程中起着重要作用。CNX过表达对野生及突变细胞的转运没有调控作用,但可能可以恢复部分轻微构象异常杂合型细胞的转运异常,另外,CNX的减表达对野生型细胞的转运无影响,而减表达却使部分滞留内质网的突变和杂合型细胞的蛋白转运出内质网,尤其是对杂合型细胞的转运异常更为明显,因此,CNX在HERG突变通道蛋白的转运异常中发挥重要作用并主要以滞留作用为主,且可通过调控分子伴侣CNX的表达水平在一定程度上纠正HERG突变通道蛋白的转运异常。