抗菌肽对口腔常见致病菌及biofilm的抑制作用以及抗炎活性的研究

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抗菌肽具有分子小,水溶性和稳定性较好的特点,同时不具有抗原性等诸多优点。大部分的抗菌肽带正电荷,能够与带有负电荷的细菌细胞膜通过静电吸引结合,并通过特有的两亲性结构插入细菌细胞膜形成孔洞,这种特殊的抗菌机制,使细菌很难对抗菌肽产生耐药性。抗菌肽除了对细菌有较好的活性,对真菌也有杀伤作用。本文采用本实验室建立的抗菌肽库中9种抗菌肽对口腔致病菌进行了抗菌活性的研究。实验结果显示L-K6、L-K6V2和Temporin-1CEa3个抗菌肽具有好的抗菌活性,对嗜酸乳杆菌和变异链球菌MIC值都小于10μM;而Chensinin-1b、L-K6和Temporin-1CEa对变异链球菌和白色念珠菌作用较好。采取Time-Kill曲线实验研究L-K6、L-K6V2和Temporin-1CEa3种肽的杀菌动力学、抗生素后效应(PAE)。并通过激光共聚焦显微镜观察3种肽对口腔常见菌变异链球菌的biofilm的影响。实验结果发现L-K6、L-K6V2和Temporin-1CEa对致龋混合菌有较好的生物活性; Chensinin-1b、 L-K6和Temporin-1CEa对变异链球菌以及白色念珠菌的杀菌和抑菌能力,呈现浓度依赖性,并且在分别2×MIC浓度的时候的PAE时间为1~2h。除此之外,本文采用结晶紫染色的方法测定Chensinin-1b、L-K6和Temporin-1CEa对变异链球菌Biofilm的MBIC和MBRC值,并使用激光共聚焦显微镜观察这3种抗菌肽对细菌Biofilm的作用,发现抗菌肽对变异链球菌的Biofilm具有抑制和分解的作用。最后,通过测定THP-1细胞释放炎症因子的方法衡量Chensinin-1b、L-K6和Temporin-1CEa的抗炎作用,发现抗菌肽对LPS、LTA以及IL-1β引发的炎症因子的释放都有抑制作用,说明抗菌肽能够抑制炎症的发生。
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