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目的:通过实验测定micro RNA-100(mi RNA-100)对膀胱癌T24细胞系中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和survivin蛋白及m RNA表达的调节作用,探讨mi R-100对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响。方法:用人工合成的miR-100相应的双链互补DNA片段,插入pSilencerTM 3.1-H1neo载体表达载体,经测序鉴定后作为micro RNA的表达质粒;采用瞬时转染方法用LipofeetamineTM2000(脂质体2000)将mi R-100高表达质粒转染进膀胱癌T24细胞,培养24小时后选择成功转染存活率较高的细胞系继续培养。培养48小时后用RT-PCR技术和Western blot方法分别检测该细胞系中VEGF和survivin的m RNA和蛋白表达情况,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测膀胱癌T24细胞在24h、36h、48h和60h增殖的变化情况。再采用Annexin V/PI双染色法进行流式细胞术检测膀胱癌细胞T24的凋亡情况。统计学方法整理分析各组实验数据结果。结果:1.Western blot结果显示miR-100能够抑制VEGF(6.20±1.13)%,P<0.05。和survivin蛋白的表达(5.60±1.02)%,P<0.05。2.RT-PCR方法分析显示VEGF(9.85±3.20)%,P<0.05.和survivin m RNA水平降低(8.22±3.21)%,P<0.05。3.MTT显示转染后细胞的生长速率比未转染的细胞明显减慢,继续培养60小时后抑制率(11.54±4.07)%,P<0.05。4.流式细胞仪检测显示:转染mi R-100后的T24细胞凋亡率较空白组和对照组增加(46.35±2.14%),P<0.05。细胞周期中G0/G1期细胞比率增高。结论:1.mi R-100抑制T24膀胱癌细胞增殖,提示可能是mi R-100RNA抑制了VEGF和survivin的基因的表达有关。2.mi R-100能促进T24细胞凋亡,凋亡机制可能与细胞周期阻滞有关。