前言 卵巢癌在女性生殖器癌瘤中的发生率占第三位，但其死亡率却居第一位。因为70％以上的卵巢癌患者一经临床诊断已达晚期，手术难以彻底根除，后续的化疗治疗也因耐药而受限，因此，其高复发率、高死亡率近年来没有明显改变。如何早期诊断，确定病变程度、判断预后，一直为大家广泛关注。 卵巢癌的转移方式主要是脱落的癌细胞与间皮细胞的粘附过程，有多种细胞表面及胞外基质成分参与，如整合素、钙粘附素、CD44等。其中粘附分子CD44是一种广泛存在于细胞表面的跨膜糖蛋白，能与胞外基质中的透明质酸(HA)等分子结合，参与细胞与细胞、细胞与间质间的特异性粘附，能激活T淋巴细胞信号传导，引导淋巴细胞归巢，并能促进细胞因子的释放、血管生成。 人的CD44基因位于11号染色体短臂，至少由20个高度保守的外显子及其间长短不一的内含子组成，其中12个外显子可通过剪接产生多个变构体，研究发现有恶性改变的细胞，出现CD44基因变构体限制的失控，表现出更复杂的CD44表达形式，在直肠癌、乳腺癌、宫颈癌及胃癌中均发现特定CD44同型物如CD44v6、v7的过表达与不良预后有关，但在卵巢癌中相关报道尚少。 本实验用半定量RT-PCR法，检测正常卵巢组织及良性、交界性和恶性上皮性卵巢肿瘤中CD44v6、v7mRNA的表达，并结合临床资料探讨其意义。 实验材料 1．实验对象 采集自200年8月一221年10月在中国医科大学附属二院妇科手术切除的93例（年龄25－72岁，平均55．2岁）上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢组织。其中38例上皮性卵巢癌组织（按FIGO1986年修订标准，卵巢癌1期6例，11期10例，皿期13例，w期9例；其中27例行腹膜外盆腔淋巴结清扫术／3例淋巴结阳性人15例交界性上皮性卵巢肿瘤组织，30例良性上次性卵巢肿瘤组织＊ 例正常卵巢组织（均来自子宫肌瘤手术同时行卵巢切除，病理证实无异常人 2．试剂：逆转录试剂盒及PCR试剂盒3物。 3．仪器：超速低温离心机＊CR扩增仪、电泳凝胶成象自动分析系统。 实验方法 l．总RNA的提取，采取酚一氯仿一异硫氰酸抓常规方法。 2．逆转录合成CDNA，按试剂盒说明书操作。 3．PCR扩增：取 3 gi CDNA产物，引物各…l加人 PCR反应体系，在扩增仪上以94叱 30秒 一十退火三分钟一一siZ℃ 90秒进行30个月）和32个（v6）循环，全部周期结束后于72℃延伸7分。 4．扩增产物的分析：取10gi PCR扩增反应液，用2％琼脂糖凝胶电泳检测。 统计学处理：采用 Microsoft Excel软件进行统计学处理，实验数据用X。S表示，两样均数的比较采用t检验，两样本率的比较采用卡方检验。 ·二· 实验结果 二．正常卵巢组织CD44v6对均阴性。 2．CD44v7仅在一例卵巢癌组织上有弱阳性表达。 3．CD44 v6在良性、交界性、恶性上皮性肿瘤中表达率和表达量分别为 20．00助和 99．56，73．77见和 102．30，97．37防和＊ 0．44。 4．CD44 v6在晚期癌及有淋巴转移者中的表达量均高于早期及无淋巴转移者。 讨 论 CD44是一种在不同组织中广泛存在的跨膜糖蛋白人D44蛋白有以下功能①参与淋巴细胞归巢及活化②参与了淋巴细胞循环的多个环节③通过粘附、渗透、信号传导等作用，促进肿瘤细胞的转移。已有研究表明恶性肿瘤细胞CD44表达高于正常细胞，而CD44S普遍存在于肿瘤中，而CD44V表达阳性者较阴性者更容易发生转移，预后较差。其与转移的关系，涉及到CD44S与CD44y的表达失衡而且作为淋巴细胞“归巢受体”，其基因活化和表达使癌细胞具更强的运动性人测表达量的增加及复杂化使癌细胞得到一层新的保护性糖蛋白，逃避免疫监视而转移成功。因癌的组织来源及发生过程的复杂性，在不同肿瘤中的CD44有不同的种类及表现。宫颈癌有相对较明确的病因如与HPV16＊ 型感染密切相关及较明朗化的阶段化发展过程。已经证实CD44v7在良性宫颈上皮中不存在，并且在不同的宫颈上皮内的癌变过程中表达增强，而发生癌变者均为阳性，与HPV16病毒感染呈正相关。因表达早于形态学改变，故可用以预测病人宫颈恶变倾向。也证 ·3·实了其表达与预后地关系密切。W17I’trrNG等人在研究鼠的过敏反应及迟发超敏反应性疾病中，发现CMv7起到活化THI及THZ的作用，且用抗CDMv7抗体可治疗由THI介导的自体免疫病。在其后续研究中亦证实，CD44v7在自身免疫及感性结肠炎中均与动物模型有相似的表现一CD44v7出现在CD4十淋巴细胞J细胞系及巨噬细胞中，动物模型可用抗CD44v7抗体治愈。卵巢癌的大量研究中，较少发现与CMv7有关，43例卵巢癌细胞的离体实验中有一例有v7阳性表达，与本研究的表达相似。根据上述推测：CD44v7是否在感染性或变态反应相关性疾病中较有意义。 现今认为至少存在两种不同的卵巢癌发生方式，