东方百合低温诱导春化的分子调控机制

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休眠是百合鳞茎的一个自然特性,当百合低温春化解除休眠后,便可以正常生长发育并开花。本研究利用我国切花主栽东方百合品种‘索邦’(Lilium oriental hybrid’Sorbonne’)为试验试材,从形态生理学、转录组学、和蛋白质组学三个层面入手,利用Illumina/Solexa Hiseq 2000技术平台和蛋白质2D质谱技术研究东方百合‘索邦’春化过程中的生理变化和分子变化,通过一系列的形态生理分子实验,初步分析低温诱导百合成花转变的分子机理,为百合的花期改良和成花转变调控提供一定的参考。获得主要研究结果如下:1在40C低温下贮藏49d,东方百合‘索邦’鳞茎的茎尖分生组织与其顶端的距离便小于lcm,在低温贮藏过程中,百合内、外层鳞片的可溶性糖含量逐渐升高,直至最大值后便逐渐降低,此时种球己打破休眠。由此,可以把东方百合‘索邦’内层鳞片中的可溶性糖含量变化作为监测百合低温春化完成的标志。2本研究运用RNA-Seq技术发现在东方百合‘索邦’低温诱导春化阶段,MADS-box家族基因表达量发生显著变化,多个植物激素相关基因在春化处理过程中表达差异,另外在东方百合‘索邦’低温春化过程中,组蛋白修饰相关的基因表达也发生明显变化,由此表明MADS-box家族基因,物激素相关基因和DNA甲基化以及组蛋白修饰相关基因均有参与百合低温诱导春化的过程。3本研究通过蛋白质质谱技术发现在东方百合‘索邦’春化过程中,与蛋白质、氨基酸代谢相关的蛋白占所有差异蛋白点的35%,与淀粉和糖代谢相关的蛋白占所有差异蛋白点的22%,与激素信号相关的蛋白占所有差异蛋白点的18%,与转导信号相关的蛋白占6%,与转运相关的蛋白占4%。这些差异表达的蛋白在糖类物质合成代谢、氧化衰老、氨基酸代谢、乙烯信号及传递和细胞形态建成方面起着至关重要的功能。并且差异表达的不同蛋白相互作用,共同参与植物体内复杂的生理生化过程,从而诱导百合在在低温诱导下顺利通过春化,进而现蕾开花。4本研究运用RACE技术成功克隆了东方百合‘索邦’春化过程中的两个基因LoVRN1和LoSVP,并通过拟南芥转基因技术发现,LoSVP可以延迟拟南芥开花的时间,而相反,LoVRNl基因可以促进拟南芥提前开花。并且,LoVRNl 基因在拟南芥花型的改变上还有一定的作用。
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