目的与背景:牙周炎是一种口腔疾病,其典型临床表现有牙龈出血、牙周软组织附着丧失、牙周袋形成和牙槽骨丢失。严重的牙周炎将导致牙齿的脱落,并且进一步造成牙槽骨丢失,这将为后续的修复造成困难,且增加了发生种植体周围炎的风险。牙菌斑是引发牙周炎的始动因素,同时宿主对细菌病原体的异常防御也在牙周炎进展中起着不可忽视的作用。牙龈卟啉单胞菌被广泛认为是牙周病主要致病菌,这一微生物是在侵袭性牙周炎、慢性牙周炎和急性牙周炎患者的口腔中均有发现。目前临床常通过机械清创以及全身和局部运用药物的方法,如刷牙、刮治、洁治来消除细菌。机械清创通常可以改善牙周,然而,有些部位的效果无法达到预期。牙龈卟啉单胞菌等致病菌可进入上皮细胞,延长慢性炎症并加重附着丧失的进展,影响机械治疗的效果,所以牙周病的治疗还应该重视根除或抑制牙周袋内的致病微生物。在这些情况下,全身或局部抗生素治疗可以帮助改善机械清创临床结果。全身使用奥硝唑是治疗牙周病的选择之一,这种杀菌药物可以破坏细菌的DNA,导致细菌死亡,且对牙龈卟啉单胞菌有良好的效过。然而,由于这些抗菌药物的广泛使用,许多细菌已经适应了目前的许多抗生素,并产生了耐药性,从而导致抗菌药物的有效性降低,而耐药性细菌出现的比例却在增加。而局部提供抗菌药物可造成更高的局部药物浓度,并减少与剂量有关的全身毒性,还可以降低细菌产生耐药性的几率。水凝胶是一种高分子网络体系,其质地柔软,但可以维持一定的空间形状,同时具有很高的含水量,可以利用其负载其他一些材料和药物,并用于生物医药邻域。近年来,越来越多的研究制备出了具有各种优良性能的水凝胶,因此本研究的目的是制备一种具有良好生物相容性和优良机械性能,还可以负载和缓释奥硝唑的水凝胶,并探究此水凝胶的理化性能、细胞毒性、抑菌活性和对牙周炎治疗的效果。方法:以N-羧乙基壳聚糖、氧化透明质酸-醛和己二酸二酰肼为原料,制备了水凝胶,并在其中负载奥硝唑,观察并使用流变仪测定水凝胶的自修复、可注射与流变性能。借助于扫描电镜扫描水凝胶和载奥硝唑水凝胶的微观形貌,观测水凝胶材料的孔隙大小。将负载奥硝唑的水凝胶放置在PBS中,测试其奥硝唑释放情况。使用CCK 8法检测水凝胶对MC3T3-E1生长情况的影响。通过抑菌环实验测定水凝胶的抗菌性能,使用结晶紫染色法水凝胶测定载奥硝唑水凝胶对细菌生物膜形成的影响。利用结扎并接种牙龈卟啉单胞菌的方法建立大鼠牙周炎模型,建模成功后分为牙周炎组、牙周炎+水凝胶组和牙周炎+载奥硝唑水凝胶组。其中后2组于牙周袋处给予相应水凝胶,注射于上颌第一磨牙牙周袋内,至术后4周处死大鼠,取上颌作为标本,利用体式显微镜来观察并测量各组样本第一磨牙的牙槽嵴顶至釉牙骨质界的距离,测算平均值为样本结果,统计学分析组别差异性。HE染色观察大鼠牙周组织切片的形态学改变,评判牙龈炎症状态、纤维结缔组织变化和牙槽骨组织变化。结果:载奥硝唑水凝胶具有优良的可注射性能和自修复性能,扫描电镜示:所制备的载奥硝唑水凝胶结构疏松多孔,且孔径均匀一致,在100-200nm之间。且可维持7天的奥硝唑释放,在第一天有突释,前3天维持较高浓度。MC3T3-E1细胞与载奥硝唑水凝胶混合培养后细胞毒性实验示其生长良好。抗菌实验可见载奥硝唑水凝胶组有明显的抑菌环,细菌生物膜的量低于空白对照组的10倍。大体观察显示局部应用载奥硝唑水凝胶后出血指数明显下降,牙龈形态色泽较好,质地坚韧。体式显微镜观察大鼠牙槽骨组织可见奥硝唑水凝胶组牙槽骨高度明显大于牙周炎组与空白水凝胶组,比较统计学差异明显。组织学评价显示牙周炎大鼠局部应用载奥硝唑水凝胶后,牙槽骨和纤维结缔组织修复再生明显,牙龈组织炎症具有明显改善。结论:1.载奥硝唑凝胶是一种具有可注射性、自修复性且具有良好的孔隙结构和优良的生物相容性的牙周药物缓释体系。2.载奥硝唑水凝胶可有效抑制牙龈卟啉单胞菌生长,且减少细菌生物膜形成。3.载奥硝唑水凝胶可抑制大鼠的牙周组织炎症并促进大鼠牙周组织修复再生。