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目的:本课题旨在研究汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)和屈洛昔芬(Droloxifen,DRL)单独及联合应用对人慢性粒细胞白血病急性红白血病变细胞株K562及其耐药细胞株K562/A02的核因子кB(nuclear factor kappaB, NF-кB)表达的影响,以探讨它们逆转多药耐药的作用机理,为Tet和DRL作为耐药逆转剂的临床应用提供理论依据。方法:(1) 采用免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)法检测Tet(1μΜ)、DRL(5μΜ)单独及联合作用于K562细胞和K562/A02细胞一定时间细胞NF-кB核转位水平变化;(2) 采用蛋白印迹法(Western blotting)检测Tet(1μΜ)、DRL(5μΜ)单独及联合作用于K562细胞和K562/A02细胞一定时间细胞胞核NF-кB蛋白表达水平的变化。结果:(1) 免疫细胞化学法检测Tet、DRL单独及联合应用对K562和K562/A02细胞NF-кB核转位水平的影响:①K562/A02细胞NF-кBp65核转位水平明显高于K562细胞(P<0.01);②Tet、DRL单独及联合作用6小时、12小时,对K562细胞的NF-кB核转位水平无明显影响(P>0.05);③两药单独及联合作用6小时、12小时, 可明显降低K562/A02细胞NF-кB蛋白核转位水平(分别为P<0.05和P<0.01),两药联合作用增强(P<0.05),作用于K562/A02细胞12小时较作用6小时效果更显著(P<0.05);(2)Western blotting检测Tet、DRL单独及联合应用对K562和K562/A02细胞胞核NF-кB蛋白的影响:①K562/A02细胞的胞核NF-кB蛋白表达明显高于K562细胞(P<0.01);②Tet、DRL单独及联合作用6小时、12小时,对K562细胞胞核NF-кB蛋白表达水平无明显影响(P>0.05);③两药单独及联合作用6小时、12小时,明显下调K562/A02细胞胞核的NF-кB蛋白表达(分别为P<0.05和P<0.01),两药联合作用增强(P<0.05), Tet和DRL作用于细胞12小时较6小时效果更显著(P<0.05)。数据资料以x±s表示,用SPSS10.0统计软件对数据进行统计分析。判断均数差异显著性,P<0.05差异有显著性意义,P<0.01差异有非常显著性意义,P>.05差异无统计学意义。结论:(1) K562/A02细胞的胞核NF-кB蛋白表达明显高于K562细胞,NF-кB的<WP=5>活性增高可能参与了K562/A02细胞耐药发生机制;(2)有效逆转浓度的Tet(1μΜ)和DRL(5μΜ)单独及联合应用均可降低K562/A02细胞的NF-кB 蛋白表达,而对K562细胞的NF-кB表达无明显影响,抑制NF-кB活性可能参与了两药逆转K562/A02细胞多药耐药的机制。