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以目前难繁殖的两种植物,玻利维亚秋海棠和日本核桃为试验材料,针对生产中出现的生产效率低,品种一致性难以维持以及组培中出现的污染率较高,外植体褐变严重等问题,进行了玻利维亚秋海棠’Crackling Fire(?)’(Begonia boliviensis)和日本核桃((Juglans mandshurica var. sachalinensis)的组培技术开发的研究。主要结果如下:1.玻利维亚秋海棠组培技术的开发(1)对于4个品种玻利维亚秋海棠’Crackling Fire(?)’来说,最佳的灭菌方法是,将采取的外植体用中性洗剂洗净后用自来水反复冲洗,然后放入浓度为70%的乙醇中分别浸泡60s,接着放入添加Tween20的浓度为1%的次氯酸钠(NAClO)溶液中浸泡10min,之后在超净操作台上用灭菌水冲洗4次。(2)初代培养最适的外植体为茎段。初代培养的最适培养基为1/2NMS+TDZ10.0pM+NAA0.1μM+琼脂7g/L+蔗糖30g/L。(3)继代培养中,对粉色(B. boliviensis var. sunjirapi),乳黄色(B.boliviensis var. sunjiracrem)和橙色(B. boliviensis var. sunjiraore)品种,最适培养基组合为1/2N MS+TDZ10.0μM+NAA0.1μM+琼脂7g/L+蔗糖30g/L。(4)生根培养中,对对粉色(B. boliviensis var. sunjirapi),乳黄色(B.boliviensis var. sunjiracrem)和橙色(B. boliviensis var. sunjiraore)品种,最适生根培养基组合为1/2N MS+CPPU0.1μM+NAA0.1μM+琼脂7g/L+蔗糖30g/L,生根率为100%。(4)对粉色(B. boliviensis var. sunjirapi),乳黄色(B. boliviensis var. sunjiracrem)和橙色(B. boliviensis var. sunjiraore)品种来说,使用单个芽作为外植体进行增殖培养是增殖效率最高的方法,6周培养的增殖率分别为10.5、10.1和14.8。2.日本核桃的组培技术的开发(1)对于日本核桃来说,最佳的灭菌方法是,将采取的外植体用中性洗剂洗净后用自来水反复冲洗,然后放入浓度为70%的乙醇中分别浸泡60s,接着放入添加Tween20的浓度为1%的次氯酸钠(NAClO)溶液中浸泡12min,之后在超净操作台上用灭菌水冲洗4次。(2)初代培养中,目前最适的培养基组合为WPM+TDZ1.0μM+Gelrite2g/L+蔗糖30g/L和WPM+Zeatin10.0μM+Gelrite2g/L+蔗糖30g/L,培养基中添加5.0mg/L的Vc作为抗氧化剂抑制褐变,pH调整为5.8。(3)继代培养中,添加了Zeatin的培养基叶的分化更完全,且生长速度更快。添加了TDZ的培养基中诱导产生了更多的愈伤组织。