肝郁脾虚证动物模型的实验研究

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目的:  通过造模思路与方法的探索,建立和复制符合中医证候特点的肝郁脾虚模型并初步探讨肝郁证模型评价体系。  方法:  1.肝郁脾虚证动物模型制备:(1)复制肝郁脾虚证动物模型;①利血平肝郁脾虚证动物模型制备;②四氯化碳(CCl4)复制肝郁脾虚模型制备;(2)创建复合情志刺激大鼠肝郁脾虚模型。  2.肝郁脾虚相关指标测试  (1)肝郁脾虚动物症候表现  眼睛状态、日常理毛、皮毛变化、对外界刺激的反应、大便性状、挣扎时的表现、精神状态。  (2)客观指标测定  ①精神行为学指标的测试:摄食、体重、蔗糖水偏嗜度;高架十字迷宫;强迫游泳实验;自主活动测试;②血液学指标检测:动物血球仪测定血红蛋白含量和血小板计数;③免疫器官指数:剖取脾脏、胸腺,称重,计算脾脏、胸腺指数(mg/g);④脑组织单胺类神经递质变化:采用荧光分光光度法测定脑组织中多巴胺(简称DA)、5-羟色胺(简称5-HT)。  (3)经典疏肝方剂对抗效应验证模型成败  用疏肝健脾经典名方逍遥丸与清泻肝火经典名方龙胆泻肝丸进行对抗研究。  结果:  1.利血平所致肝郁脾虚模型  肝郁脾虚动物症候表现、体重、摄食、蔗糖偏爱度%、自主活动、胸腺指数和脾脏指数显著低于空白对照组,强迫游泳不动时间延长显著高于空白对照组;大鼠所用时间短,小鼠养殖成本低,好操作,所耗时间较长,行为表现没有大鼠显著。  2.CCl4组致肝郁脾虚模型  肝郁脾虚动物症候表现、体重、摄食、蔗糖偏爱度%、自主活动、胸腺指数和脾脏指数、强迫游泳不动时间与空白对照组相比未见明显差异。  3.情志刺激致大鼠肝郁脾虚证模型  模型对照组大鼠体重增长、糖水消耗量、水平运动和垂直运动显著低于空白对照组、水中静止时间显著高于空白对照组,血红蛋白、血小板减少、胸腺指数和脾脏指数、5-HT和DA含量显著低于空白对照组;疏肝健脾方逍遥丸组体重增长、糖水消耗量、水平运动和垂直运动、血红蛋白、血小板减少、胸腺指数和脾脏指数、5-HT和DA含量显著高于模型对照组,水中静止时间显著低于模型对照组。  结论:  1.利血平成功复制肝郁脾虚模型;利血平致大鼠肝郁脾虚模型,是研究肝郁脾虚模型行为学较好的选择;  2.CCl4复制肝郁脾虚模型不理想;  3.自创复合情志法成功创立符合中医证候特点的大鼠肝郁脾虚模型。
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