论文部分内容阅读
目的：观察半胱氨酰白三烯(CysLT)受体(CysLT1R和CysLT2R)对小鼠BV2小胶质细胞吞噬功能的调节作用,并初步探讨CysLT受体两种亚型之间是否存在相互作用。方法：1.采用CysLT受体激动剂(LTD4和NMLTC4)和小胶质细胞激活剂(LPS和IFN-γ)作用一定时间,以免疫荧光法和流式细胞术检测BV2细胞吞噬功能的变化。2. CysLT1R选择性拮抗剂montelukast和CysLT2R选择性拮抗剂HAMI3379预处理30min后,检测对激动剂或激活剂引起的吞噬功能变化的作用。3.以Western blotting法检测LPS和IFN-y引起的CysLT1R及CysLT2R表达的变化,以及montelukast和HAMI3379对LPS引起的表达变化的影响。4.以免疫荧光共染法检测(?)CysLT受体激动剂LTD4和NMLTC4以及LPS是否引起CysLT1R和CysLT2R分布的变化；在确定的作用时间点,用激光共聚焦显微镜进行初步验证。结果：1.免疫荧光法和流式细胞术都表明,CysLTs受体激动剂LTD4和NMLTC4以及小胶质细胞激活剂LPS和IFN-γ,均增强BV2细胞吞噬功能。2. Montelukast和HAMI3379能对抗BV2细胞吞噬功能的增强。Montelukast(0.1μmol/L)和HAMI3379(1μmol/L)均显著抑制LTD4诱导的吞噬增强；montelukast (0.1-1μmol/L)和HAMI3379(1μmol/L)均明显抑制NMLTC4诱导的吞噬增强,且montelukast作用强于HAMI3379. Montelukast和HAMI3379(1μmol/L)均显著抑制小胶质细胞激活剂LPS诱导的吞噬增强。3.LPS和IFN-γ均上调BV2细胞的CysLT1R和CysLT2I表达,其中,IFN-y使CysLT1I表达仅有增加趋势,而CysLT2I表达明显增加；LPS显著增加CysLT1R和CysLT2R的表达,且该作用能被montelukast和HAMI3379所拮抗。4.BV2细胞激活导致CysLT1R和CysLT2R分布的变化,CysLT1R与CysLT2I存在共定位,激活后发生内移的特点与时间基本一致。结论：1.CysLT1R和CysLT2R共同参与BV2细胞激活的调节,表现为细胞吞噬功能增强以及CysLT1R和CysLT2I滚达增加,特异性拮抗剂使用后上述现象被逆转。2. CysLT1R和CysLT2R之间可能存在的相互作用,但需进一步研究确定。