兔肝纤维化模型的建立及自体骨髓干细胞移植治疗

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目的:建立四氯化碳诱导的兔肝纤维化动物模型,将体外分离标记的自体骨髓单个核细胞经肠系膜上静脉植入肝纤维化动物体内,观察移植细胞能否归巢至病变组织并促进其再生修复,从而改善肝功能。方法:1兔肝纤维化模型的建立:40%四氯化碳橄榄油溶液按(1~1.5ml/kg背部皮下注射,每周2次,持续12周),直至病理显示肝组织纤维化。2密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,用BrdU标记移植细胞。3将标记细胞经肠系膜上静脉植入模型动物体内。4移植后疗效判定:造模12周及移植后第3、7、14、21天进行肝功能检测、肝组织病理学分析及BrdU免疫组化分析。结果:1动物模型的病理组织学变化:皮下注射四氯化碳橄榄油溶液第12周,病理组织学观察,模型组兔肝细胞脂肪变性坏死,伴较多炎性细胞浸润,中央静脉周围及汇管区纤维组织增生明显,纤维间隔形成,肝小叶结构紊乱。2肝功能变化:自体骨髓单个核细胞移植第21天,移植组血清ALT、AST活性较对照组明显降低(P<0.05);血清TBIL、DBIL含量较对照组明显降低(P<0.05);血清ALB含量较对照组升高(P>0.05)。3细胞移植后的肝病理组织学变化:移植细胞后,随着时间延长,病理检测显示纤维化肝组织逐渐修复,同样时间内细胞移植组修复程度明显好于对照组。4移植细胞在肝组织中的分布示踪:移植细胞于移植第3天在肝小叶中央静脉周围BrdU阳性染色并持续至实验结束,对照组BrdU染色阴性。结论:1皮下注射40%四氯化碳橄榄油溶液12周,建立了典型的兔肝纤维化模型。2骨髓单个核细胞经肠系膜上静脉途径移植后,能够迁移至纤维化肝组织。3骨髓单个核细胞移植能够降低血清ALT、AST活性,降低血清TBIL、DBIL含量,升高血清ALB含量,改善肝功能。
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