目的：　　小RNA SbfR是本课题组通过Solexa高通量测序技术首次在伤寒沙门菌中发现的一个非编码RNA，相关分子特性分析结果显示，SbfR可能是一反式编码RNA。本论文旨在初步探索SbfR在伤寒沙门菌中发挥的调节作用和机制，为后续研究SbfR靶基因及作用机制奠定基础。　　方法：　　1. 伤寒沙门菌转录组分析：将 SbfR 缺陷株（ΔSbfR+pBAD）和 SbfR 回补株（ΔSbfR+pBAD-SbfR）培养至对数期（OD600≈0.4），加入L-阿拉伯糖诱导后提取细菌总RNA，加入荧光素进行逆转录，标记后的cDNA与全基因组芯片杂交，扫描并进行数据分析，比较SbfR缺陷株和回补株基因表达谱差异。选择部分差异表达基因进行qRT-PCR，验证基因芯片结果。　　2. qRT-PCR分析基因表达：分别提取各菌株总RNA并逆转录为cDNA，进行qRT-PCR实验，检测基因的mRNA水平。　　3. 细菌在不同温度下的生长曲线测定：分别在37℃和42℃培养SbfR缺陷株和回补株，每隔1h检测OD600值，以OD600数值作纵坐标，以时间作横坐标，绘制SbfR缺陷株和回补株的生长曲线，比较SbfR对细菌在两种温度下生长情况的影响。　　4. SbfR片段分部回补株构建：分别构建连有SbfR前69nt和后69nt片段的重组载体，所用质粒为pBAD/Myc-HisA，并将重组载体电转入ΔSbfR，制备前69nt和后69nt SbfR片段回补株。　　5. 细菌动力实验：将空载体株（WT+pBAD）、SbfR 缺陷株、SbfR 回补株及SbfR片段分部回补株分别培养至对数期，用接种针蘸取菌液点种于LB半固体动力板，置于37℃孵箱过夜，测量细菌圈直径，分析SbfR对细菌动力的影响。　　6. Western-blot检测FljB表达水平：将空载体株、SbfR缺陷株和SbfR回补株培养至对数期，收集全菌蛋白，用兔抗FljB抗血清进行Western-blot实验，检测各菌株FljB表达水平。　　7. HeLa细胞侵袭实验：将空载体株、SbfR缺陷株和SbfR回补株培养至对数期，与HeLa细胞共孵育90min，弃去培养液。一半细胞孔中加入Triton裂解细胞，涂板培养，计数菌落数为粘附水平；一半细胞孔中加入庆大霉素培养 90min后，加入Triton裂解细胞，涂板培养，计数菌落数为侵袭水平。　　8. 生物膜形成实验：在 TSB 培养基中分别培养空载体株、SbfR 缺陷株、SbfR回补株及SbfR片段分部回补株至对数期，转种至96孔板，30℃静置4天，洗去浮游细菌并用结晶紫对生物膜染色，30%冰醋酸洗脱后595nm比色测定。　　结果：　　1. 基因芯片分析结果显示，SbfR 缺陷株与回补株之间共 99 个基因表达水平存在差异；qRT-PCR结果与基因芯片分析数据相比，基因变化趋势一致。　　2. 生长曲线测定结果表明，在37℃条件下SbfR缺陷株与回补株的生长情况一致，而在42℃条件下回补株的生长明显慢于缺陷株。　　3. 成功构建 SbfR 前 69nt 片段和后 69nt 片段的回补株（ΔSbfR+pBAD-F69，ΔSbfR+pBAD-L69）。　　4. 动力实验结果表明，与空载体株相比，SbfR缺陷株动力下降，回补株动力恢复；两部分SbfR片段回补株动力均恢复到空载体株水平，且与SbfR全长回补株动力水平一致。　　5. 与空载体株相比，SbfR缺陷株FljB表达水平下降，回补株FljB表达水平恢复。　　6. 与空载体株相比，SbfR缺陷株对HeLa细胞的侵袭能力下降，回补株的侵袭能力恢复。　　7. 与空载体株相比，SbfR缺陷株的生物膜形成能力下降，回补株的形成能力恢复。两部分SbfR片段回补株生物膜形成能力均部分恢复，与空载体株水平一致，但比SbfR全长回补株弱。　　8. SbfR缺陷株hslS、hslT、htpG、fliA、fljB、sopE等基因的转录水平低于SbfR回补株；flhD的转录水平高于SbfR回补株；prgJ、fimA、csgA、yihP、rfaD、bcsA、wcaA、bapA等基因的转录水平与SbfR回补株的差异无统计学意义。　　结论：　　sRNA SbfR参与伤寒沙门菌热应激条件下生长、动力、侵袭、生物膜形成等方面的调节，抑制热应激条件下细菌生长，促进细菌动力、侵袭和生物膜形成能力。SbfR前69nt和后69nt回补株均可独立完成全长SbfR对细菌动力的促进作用，但在形成生物膜能力方面两种部分回补株分别发挥全长SbfR的部分调控作用。