白介素35蛋白在糖尿病视网膜病变中作用的初步研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zwb20042002
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目的:白介素35在调节T细胞及B细胞免疫应答及炎症反应中起重要作用,本文将通过测定其在糖尿病视网膜病变患者血清及玻璃体中的表达,以及体外实验探讨白介素35蛋白对人视网膜色素上皮细胞(Acute retinal pigment epithelial cell,ARPE-19)功能的影响,以期探讨其与糖尿病视网膜病的关系。方法:选择在2014年9月至2015年11月期间重庆医科大学附属第一医院眼科住院部的2型糖尿病患者,根据国际标准将其分为糖尿病无视网膜病变组(DWR)、非增殖性糖尿病视网膜病变组(NPDR)及增殖性糖尿病视网膜病变组(PDR),纳入特发性黄斑前膜需行玻璃体切割术患者作为对照组。分别抽取2型糖尿病及患者对照组患者及静脉血,离心分离出血清;于手术中抽取增殖性糖尿病视网膜病变患者及对照组患者玻璃体液,离心取上清。使用酶联免疫吸附试验分别测定各血清及玻璃体液中白介素35的蛋白表达水平。将ARPE-19细胞分为低糖组(5.5mmol/L D-葡萄糖)、高渗对照组(5.5mmol/L D-葡萄糖加20mmol/L甘露醇)、高糖组(25mmol/L D-葡萄糖)、高糖+IL-35蛋白组A(25mmol/L D-葡萄糖加重组白介素35蛋白20ng/ml)、高糖+IL-35蛋白组B(25mmol/L D-葡萄糖加重组白介素35蛋白50ng/ml)、高糖+IL-35蛋白组C(25mmol/L D-葡萄糖加重组白介素35蛋白100ng/ml)。利用RT-PCR测定ARPE-19细胞中IL-35及其受体各亚基、IL-6、MCP-1及VEGF mRNA的表达,利用CCK8测定各组细胞活力,ELISA测定各组细胞上清中IL-6、MCP-1及VEGF的表达水平。结果:PDR患者血清中白介素35蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PDR组患者玻璃体液中IL-35蛋白表达水平较对照组显著降低(P<0.001)。而白介素35蛋白表达水平在DWR组患者及NPDR组患者血清中表达水平与对照组无显著性差异(P>0.05)。体外实验结果显示:高糖培养下的ARPE-19细胞中IL-35及其受体各亚基mRNA表达显著降低(P<0.05);重组IL-35蛋白可显著缓解高糖处理对ARPE-19细胞活力的抑制作用,并可对高糖促进ARPE-19细胞分泌炎症因子IL6及MCP-1、生长因子VEGF的能力有显著的抑制(P<0.05)。结论:白介素35可能与增殖性糖尿病视网膜病变的发病机制相关。
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[专家简介]温铁军(1951-),男,北京人,管理学博士,现任中国人民大学可持续发展高等研究院执行院长、福建农林大学新农村发展研究院执行院长等科研机构负责人.兼任国务院学位委
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