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心血管疾病发生发展的研究和microRNA的研究同属于21世纪生命科学的热点领域。要对心血管疾病,尤其是动脉粥状硬化的形成有全面和深入的认识,必须在整体、动态和网络的水平上对其进行研究。本实验以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,应用体外血流剪切力刺激,对其信号通路、基因调控、生物学特性的改变,尤其是microRNA表达量的变化进行研究。对血流剪切力下HUVEC中的microRNA和信号通路之间回馈调节进行探索。采用灌注酶消化法分离所得的脐静脉内皮细胞不仅纯度高而且数量充足,细胞活力高、增殖能力强,通过鉴定符合血管内皮细胞的特性并且能够稳定的进行传代培养以及冻存复苏,所以能够很好的满足接下来的实验需要,对进一步研究血管内皮细胞的生物学特性有重要意义。应用体外血流动力学系统研究在剪切力下HUVECs的生物学特性的改变,首次发现了miR-19a和miR-23b/27b分别受PI3K和MAPK的调控,PI3K和MAPK可能分别为miR-19a和miR-23b/27b的上游调控因子。在用Antagomir-19a(AM19a)抑制miR-19a后,PI3K通路被阻断;用AM23b、27b分别抑制miR-23b、27b后,MAPK通路中的三个成员ERK,P38,JNK的磷酸化全部下降,以上可以作为microRNA回馈调节信号通路的一个指示。而且过表达miR-19a可以逆转PI3K抑制剂造成的抑制效果;过表达miR-23b、27b对MAPK的活性有着类似的效果。因此,以上发现可证明PI3K和MAPK介导的剪切力调控的miR表达量转而又调控剪切力相关信号通路,在miR和信号通路之间存在着一个回馈调节的作用。综上所述,本研究以体外分离培养的HUVECs为研究对象明确了在血流剪切力下HUVECs的生物学特性变化;首次发现miR-19a与PI3K信号通路;miR-23b、27b与MAPK信号通路之间的回馈调节作用,为探索血流剪切力作用下HUVECs内信号通路和microRNA作用途径提供了理论基础,为更好地研究心血管病发生发展机理提供了充分的实验依据。