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目的:机体结核病免疫主要依赖以T细胞介导的细胞免疫为主。机体对结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis，MTB)产生细胞免疫必须由抗原提呈细胞(antigenpresenting cell，APC)介导。作为最有效的抗原提呈细胞，树突状细胞(dendritic cell，DC)在结核病免疫中的作用日益受到关注。研究发现肺结核病患者DC功能有一定程度的缺损，并且当MTB感染后DC的成熟标记表达水平降低，表明DC的成熟受到MTB的抑制。本实验通过体外细胞培养的方法对初治结核病患者DC细胞表面成熟标志的表达、细胞因子的分泌、以及对T淋巴细胞的刺激作用等进行研究，探讨外周血DC在结核病发病机制中的作用，为开发抗结核病的免疫治疗方法和开发新型的抗结核疫苗提供重要的科学依据。 方法: 1.收集石家庄市第五医院就诊的初治结核病患者58例，根据《临床诊疗指南-结核病分册》的诊断标准分为菌阴组30例，菌阳组28例。对照组收集健康体检者30例。 2.无菌采集初治结核病患者和健康体检者外周静脉血5ml，10U/ml的肝素抗凝，用淋巴细胞分离液经密度梯度离心法分离单个核细胞，贴壁3小时后将非黏附细胞洗去，将贴壁细胞在含有rhGM-CSF和rhIL-4的AIM-V培养液中进行培养。分别在第2、4、6天进行半量换液，第7天收集DC。在培养的过程中用倒置显微镜观察细胞的大小、形态及生长情况，并拍照记录。 3.用FITC标记的CD83和PE标记的CD86抗体标记各组DC，用流式细胞仪检测各组DC的表面标志CD83和CD86的表达率。 4.以同种异体混合淋巴细胞作为靶细胞，用经丝裂霉素C处理过的各组DC作为刺激细胞，用MTT法检测各组DC促进同种异体T淋巴细胞的增殖能力。 5.采用酶联免疫方法(ELISA)检测各组DC培养上清中及各组血清中的IL-12、IL-10、INF-γ的含量。 6.汇总整理所有数据，并应用SPSS13.0软件进行统计学分析，以P＜0.05作为检验水准，数据用均数±标准差((x)±s)表示，进行两样本均数的t检验。 结果: 1.用倒置显微镜观察发现初治结核病患者的DC在培养过程中，DC生长密度比正常对照组的密度低，形态也不及正常对照组的形态典型。 2.正常对照组、菌阴组和菌阳组CD83的表达量分别为（9.18±6.91）％、(4.10±3.13)％和(2.36±1.31)％;CD86的表达量分别为（92.23±2.62）％、(71.90±12.43)％和(69.33±13.62)％。菌阴组和菌阳组CD83、CD86的表达均显著低于正常对照组(p＜0.001)，菌阳组CD83的表达显著低于菌阴组(p＜0.05)，而菌阴组与菌阳组CD86的表达差异无显著性(p＞0.05)。 3.混合淋巴细胞增殖实验的结果:正常对照组、菌阴组和菌阳组刺激指数(SI)分别为（5.74±2.20）％、(3.42％±1.25)％和(2.96％±1.27)％。菌阴组和菌阳组均显著低于正常对照组(p＜0.01)，而菌阴组与菌阳组比较差异无显著性（p＞0.05）。 4.各组DC培养上清中细胞因子水平变化:正常对照组、菌阴组和菌阳组DC培养上清中IL-12的含量分别为(21.80±8.04) pg/ml、(31.83±16.95)pg/ml和(30.99±14.72) pg/ml，菌阴组和菌阳组均显著高于正常对照组(p＜0.05)，而菌阴组与菌阳组比较差异无显著性(p＞0.05);IL-10的含量分别为(4.04±0.80) pg/ml、(4.66±1.45) pg/ml和(4.32±0.88) pg/ml，各组间差异无统计学意义(p＞0.05）;IFN-γ的含量分别为(8.28±2.86) pg/ml、9.50±3.26)pg/ml和(9.73±4.56)pg/ml，各组间差异无统计学意义(p＞0.05)。 5.各组血清细胞因子水平变化:正常对照组、菌阴组和菌阳组血清IL-12的含量分别为（55.38±24.93）pg/ml、（39.34±16.95）pg/ml和（37.01±14.95）pg/ml，菌阴组和菌阳组均显著低于正常对照组(p＜0.01)，而菌阴组与菌阳组比较差异无显著性（p＞0.05）;血清IL-10的含量分别为（41.33±21.44）pg/ml、（111.01±41.80）pg/ml和（122.27±69.45）pg/ml，菌阴组和菌阳组均显著高于正常对照组(p＜0.001)，而菌阴组与菌阳组比较差异无显著性（p＞0.05）;血清IFN-γ的含量分别为（27.12±17.71）pg/ml、（19.08±10.49）pg/ml和（17.67±9.71）pg/ml，菌阴组和菌阳组均显著低于正常对照组(p＜0.05)，而菌阴组与菌阳组比较差异无显著性(p＞0.05)。 结论: 1.初治结核病患者外周血DC的表面标志CD83和CD86的表达量比正常对照组显著降低，刺激淋巴细胞增殖的能力也显著降低，提示初治结核病患者外周血DC的抗原提呈能力下降。 2.初治结核病患者外周血DC培养上清中IL-12的含量与正常对照组相比明显升高，提示初治结核病患者外周血DC分泌IL-12的能力增强。 3.初治结核病患者血清中IL-12和IFN-γ的水平均比正常对照组显著降低，IL-10的水平比正常对照组显著升高，提示初治结核病患者体内存在Th1/Th2平衡失调。 4.结核病患者DC功能发生了一定程度的改变，本研究为开发结核病免疫治疗方法和研发抗结核疫苗提供了新的思路。