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背景与目的:原发性肝细胞癌(hepatocellular careinoma,HCC)是一种常见的恶性肿瘤,近年来,其发病率和死亡率呈上升趋势。在我国,肝癌为第2位肿瘤死亡原因。目前外科手术是HCC首选的治疗手段,但即使是根治性切除,其术后复发率仍然很高,并且仍缺乏确切的预后指标。研究表明LKB1/STK11(serinetheronine protein kinase 11)在多种恶性肿瘤的发生发展中起着重要作用,而在HCC中研究的报道较少见,本研究采用免疫组化和RT-PCR(reversetranscriptase-polymerase chain reaction)方法检测LKB1在HCC中的表达,探讨LKB1与HCC临床病理指标和预后的关系以及与VEGF(VflSCUlar endothelialgrowth factor)和Survivin的关系。
方法:应用免疫组织化学方法检测LKB1、VEGF与Survivin在85例HCC组织以及相应的癌旁肝组织和7例正常肝脏组织中的表达,应用RT-PCR方法检测LKB1在肝癌组织,癌旁肝组织和正常肝组织中的表达,分析LKB1在mRNA水平和蛋白水平上的表达差异,分析LKB1.的表达与HCC临床病理指标及预后的关系,同时分析LKB1、VEGF与Survivin在这三种组织中的表达差异及三种蛋白在HCC中表达的相关性。
结果:肝癌组织、癌旁肝组织和正常肝组织LKBlmRNA表达阳性率分别为72.9%、96.5%和100%,组间差异有显著性(P<0.05);蛋白水平LKB1在肝癌组织、癌旁肝组织及正常肝组织中的表达阳性率分别为69.5%、96.5%和100%,组问差异有显著性(P<0.05);LKB1在肝癌组织中的mRNA水平和在蛋白水平的表达比较无明显的统计学差异(P=0.78)。肝癌组织,癌旁肝组织和对照正常肝组织中Survivin的阳性表达率分别为50.6%,24.7%,0,组间比较有明显统计学差异,(P<0.05);VEGF的阳性表达率分别为60.0%,16.5%,0,组间比较有明显统计学差异,(P<0.05)。肝癌组织中LKBl与Survivin表达呈负相关,(r=0.453,P=0.049);肝癌组织中LKB1与VEGF的表达呈负相关,(r=0.721,P=0.001)。免疫组化结果显示LKB1的表达水平与卫星结节、肿瘤大小、肿瘤包膜情况、门脉癌栓密切相关。LKB1在无卫星结节组和有卫星结节组高表达率分别为87.3%、42.4%,两组差异有显著性(P=0.010);LKB1在肿瘤小于等于5cm组和大于5cm组高表达率分别为81.4%、61.4%,两组差异有显著性(P=0.039);LKB1在无门脉癌栓组和有门脉癌组的高表达率分别为78.8%和36.8%,两组差异有显著性(P=0.007);LKB1在肿瘤包膜完整组和无肿瘤包膜或包膜不完整组高表达率分别为84.4%和64.4%,两组差异有显著性(P=0.039);表达水平与性别、年龄、HBsAg、ICGR15、肝硬化程度、TNU分期,肿瘤分化程度无关(P>0.05)。HCC中,LKB1高表达组的1、3、5年生存率分别为83.3%、71.4%及55.4%,低表达组分别为74.4%、53.5%及18.4%,log-rank检验差异有显著性(P=0.021);Survivin高表达组的1、3、5年生存率分别为76.3%、45.7%及25.1%,低表达组分别为84.6%、65.4%及48.7%,log-rank检验差异有显著性(P=0.046):VEGF高表达组的1、3、5年生存率分别为76.5%、49.0%及24.6%,低表达组分别为82.4%、64.7%及58.8%,10g-rank检验差异有显著性(P=0.009);多因素分析,经检验发现:TNM分期、肝硬化情况、根治情况和LKB1的表达情况是影响肝癌患者术后生存率的独立危险因素。
结论:HCC组织中LKB1的表达明显低于癌旁肝组织及正常肝组织,LKB1的表达在mRNA水平和蛋白水平无明显差异,LKB1的表达与VEGF的表达、Survivin的表达呈负相关,LKB1的表达水平与卫星结节、肿瘤大小、肿瘤包膜情况、门脉癌栓密切相关,LKB1的表达水平与患者术后总体生存率相关,可作为预测HCC患者行切除治疗预后的生物学指标。