蜡梅叶抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析

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本研究采用超声辅助溶剂提取法和有机溶剂梯度萃取法,对蜡梅叶的化学成分进行提取和萃取分离,得到蜡梅叶提取物及石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取物和水溶性部分等萃取组分。通过改良的Ellman法对蜡梅叶提取物以及各个萃取组分的乙酰胆碱酯酶抑制活性进行检测,数据结果显示,乙酰胆碱酯酶抑制活性最强的组分为乙酸乙酯萃取物,其IC50值为7.96 mg/mL。为进一步探究乙酸乙酯萃取物对乙酰胆碱酯酶抑制活性的物质基础,采用正相硅胶柱层析结合Sephadex LH-20凝胶柱层析方法对蜡梅叶提取物的乙酸乙酯萃取物进行了较为系统的分离纯化,共得到22个组分。组分1呈油状,对其进行气相色谱-质谱联用分析,共检测鉴定了14种化合物,其中含量最高的为亚麻酸乙酯,占总组分的19.29%。从其他组分中分离得到8个单体化合物(1-8),鉴定了其中6个化合物的结构,分别为:豆甾醇(C1,stigmasterol)、β-谷甾醇(C3,β-sitosterol)、小檗碱(C4,berberine)、d-夏蜡梅碱(C5,d-calycanthine)、东莨菪素(C7,scopoletin)、山柰酚(C8,kaempferol)。通过改良的Ellman法检测,其中化合物C4、C7和C8表现出较强的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其IC50值分别为4.98 mg/mL、3.48 mg/mL和5.34 mg/mL。
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