乙烯(Ethylene)是一种重要植物激素，与其他植物激素存在相互调节作用，并参与植物生物与非生物胁迫应答反应。生长素(IAA，Auxin)与乙烯如何相互影响共同调节盐胁迫应答机制尚需研究。　　 从美国拟南芥种子资源中心(Arabidopsisbiologicalresourcecenterstocks，ABRCStocks)购得etsc和etsfT-DNA插入突变体种子，筛选获得纯合突变体株系，之后，通过遗传杂交获得双突变株系(etscetsf)、通过转基因方法获得回补(etsc-andetsf-complementation，etsc-Candetsf-C)及超表达(ETSC-andETSFoverexpression，ETSC-OEandETSF-OE)株系。　　 表型分析显示：正常生长情况下，etsc、etsf，WT萌发率都能够达到95％以上，各株系之间无差别；幼苗时期，etsf根长度显著大于WT，ETSC-OE植株根长明显小于WT；成苗期，etsf与elscetsf植株地上部分高度显著大于WT。然而，在120-150mMNaCl处理下，etsc与etsf萌发率、etsc根伸长与WT相比显著受到抑制，而etsf根伸长未受到明显抑制。有意思的是，0.02μMIAA处理后，etsc根生长与WT一致，etsf根长优势消失且根毛变多，ETSC-OE根长依然变短(无变化)。这些结果说明，ETSC和ETSF在拟南芥生长发育过程中响应IAA与盐刺激。　　 对ETSC与ETSF进行转录水平分析，这两个基因均在彼此突变体中均过量表达：WT幼苗在150mMNaCl处理4小时后ETSC表达下降到11.0％，ETSF上升到195.9％；在0.02μMIAA处理4小时后，ETSC上升到155.8％，ETSF下降到92.0％；在0.02μMIAA与150mMNaCl共同处理4小时后，ETSC下降到13.8％，ETSF上升到114.9％。　　 以上表型与转录活性分析结果暗示，ETSC在盐胁迫应答中起主导作用，其突变体显著不耐盐，ETSC-OE表现出耐盐，etsf中ETSC超表达且表现出对盐不敏感；ETSF在IAA信号调节中起主导作用，etsf表现出低浓度IAA(0.02)μM)根伸长被促进及高浓度IAA(1μM)使根毛变多。IAA处理后消除了NaCl对ETSF的诱导表达，说明IAA参与ETSF盐胁迫应答；而NaCl处理后消除IAA对ETSC的诱导表达，说明NaCl影响ETSC对IAA信号应答。　　 组织化学染色方法探索2个基因表的时空特异性。将ETSC与ETSF启动子连接GUS报告基因后转化获得拟南芥转基因株系，染色结果显示：ETSC与ETSF在种子萌发、幼苗生长及成苗时期均能检测到表达，ETSC在根部维管组织、成熟叶片叶片中表达较高，ETSF在根中除分生区外其他生长发育时期不同组织器官中均有较高表达。同时，分别将ETSC和ETSFCDS序列连接GFP，组建瞬时表达载体，并转化拟南芥叶肉细胞原生质体，荧光观察显示：ETSC定位在细胞质与细胞核中，ETSF定位在质膜上。　　 研究报道，ETSC与ETSF可能在体外形成同源二聚体(ETSC-ETSC，ETSF-ETSF)或异源二聚体(ETSC-ETSF)，因此而介导乙烯生物合成。所以，接着利用双分子荧光互补实验(bimolecularfluorescencecomplementation，BiFC)探讨ETSC与ETSF在植物体内二聚体形成可能性。分别将ETSC和ETSF的CDS序列连接YCE、YNE并转化拟南芥叶肉细胞原生质体，激光共聚焦扫描结果表明，ETSC与ETSF在细胞质和细胞核中形成同源和异源二聚体。接下来检测二聚体的形成对乙烯含量的影响：首先通过杂交方法把乙烯合成报告基因(EthyleneBisStearamide，EBS)转入etsc和etsf中，获得转基因株系；EBS：GUS组织化学与荧光定量分析发现，与WT相比，乙烯在生长7天etsc幼苗中过量产生，且在叶片、下胚轴及根部表现尤为明显；etsf幼苗中乙烯合成量无论是在整株水平还是各个组织(叶片、下胚轴与根部)均与WT无显著差异。表明，ETSC和ETSF以二聚体形式调节乙烯生物合成，且单个基因突变后对乙烯合成具有促进作用。　　 总之，ETSC与ETSF在IAA影响下调节拟南芥乙烯生物合成进而应答盐胁迫刺激，这为进一步探索非生物胁迫下乙烯调节机制奠定基础。