蛋白核小球藻油脂检测技术评价及光生物反应器培养的研究

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小球藻小球藻(Chlorella)作为生产生物柴油的原料具有光合作用效率高、环境适应能力强、生长周期短、生物产量高、不和农作物争水争地、产油率高等优点。本研究在建立小球藻微量样品油脂检测方法的基础上,通过对光生物反应器中小球藻培养条件的优化,以达到提高其油脂产量的目的。主要研究内容如下:首先分别用Bligh-Dyer重量法、香草醛比色法和尼罗红染色法对蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa F-9)油脂含量进行检测,比较和分析了这几种检测方法的效率与灵敏度,优化了小球藻的含量检测方法。结果表明,重量法比较经典,结果准确,但灵敏度比较低,最低检测样品量为100mg。香草醛比色法和尼罗红染色法简便且灵敏度高。实验中香草醛染色法最低检测量10mg,优化的香草醛比色法可检测0.5mg-3.0mg样品。尼罗红染色法可检测200μl浓度为0.0588mg/ml-0.588mg/ml的藻液样品。最终建立了香草醛和尼罗红染色法相结合测定微量小球藻样品的检测方法,为小球藻等能源微藻的微量快速跟踪检测提供技术方法。以蛋白核小球藻F-9为研究对象,研究了气升式光生物反应器培养体系中培养基、通气速率、氮浓度、Fe3+浓度、IAA浓度、CO2补充量等环境因子对小球藻生长和油脂积累的影响。结果表明,BG-11培养基最有利于小球藻的快速生长;通气速率为2.0L/min时小球藻的生长速率和油脂产量最大分别为6.17mg·l-1·d-1和1.77mg·l-1·d-1;小球藻的生长速率随氮浓度增加而增加,而油脂含量随氮浓度增加而减少,在实验范围内对油脂产量影响规律性不强;Fe3+浓度为0.1mmol/L时小球藻的生长速率最大为7.29mg·l-1·d-1,Fe3+浓度为1.0mmol/L时小球藻油脂产量最高为2.54mg·l-1·d-1;IAA浓度为1.0mg/L时小球藻的生长速率为7.47mg·l-1·d-1,油脂产量为2.89mg·l-1·d-1,二者都达到最大值;CO2补充量为60min/d时小球藻的生长速率最大为9.88mg·l-1·d-1,补充量为40min/d时小球藻油脂产量最高为3.86mg·l-1·d-1。经过培养条件的优化,小球藻在光生物反应器培养中油脂产量比优化前提高了3.44倍。
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