论文部分内容阅读
粘细菌是一类具有复杂多细胞行为和形态发生且可以滑行的革兰氏阴性杆菌。它可以产生丰富的次级代谢产物,其次级代谢产物具有结构新、种类多、产生菌比率高、作用水平层次多、作用机制多样等特点,具有抗细菌、抗病毒、抗真菌、抗癌等活性。因此,粘细菌的研究越来越受到重视。本研究对内蒙古自治区巴彦淖尔市地区的土壤样品进行采集,对采集的45个样品进行土壤理化指标测定。采用兔粪诱导法、大肠杆菌划线诱导法、滤纸片诱导法从45份土壤样品中诱导分离出249株粘细菌,纯化出147株。根据菌落形态特征、子实体的结构特征对分离纯化的147株粘细菌进行初步鉴定,对16株典型形态菌株进行16S rDNA基因序列测定,最终能够确定种属的菌株,分别属于4个属,9个种,包括:黄色粘球菌、变绿粘球菌、橙色粘球菌、叶柄粘球菌、大孢珊瑚球菌、窄小珊瑚球菌、珊瑚状珊瑚球菌、Pyxidicoccus fallax和Cystobacter violaceuso通过平板对峙法筛选出对马铃薯晚疫病菌有拮抗作用的粘细菌,选择具有显著的抗马铃薯晚疫病菌的菌株YR-7、YR-35,根据营养细胞形态特征、粘孢子形态特征、生理生化特征及16S rDNA基因序列对菌株YR-7、YR-35进一步鉴定,鉴定结果显示YR-7为黄色粘球菌,YR-35为变绿粘球菌。选择黄色粘球菌YR-7的发酵产物做进一步研究,菌株YR-7的浓缩发酵上清液活性成分对温度有较强的耐受性,浓缩发酵上清液经30-50℃处理后,菌丝的生长抑制率可达50.90%,高于50℃时活性逐渐下降,90℃处理后菌丝的生长抑制率仍然可达25.45%。浓缩发酵上清液在pH 4.0-9.0条件下比较稳定,保持40.21%以上菌丝的生长抑制率,当pH<4.0或pH>9.0时,抗菌活性显著降低。活性物质不能被蛋白酶降解,其抗菌活性不受紫外线、自然光照射的影响。对马铃薯离体叶片的生防效果检测表明,YR-7的浓缩发酵上清液处理组叶片相对病斑面积仅为0.35%,对照组的相对病斑面积高达68.19%。粘细菌菌株YR-7产生的次生代谢产物可以有效抑制致病疫霉侵染马铃薯叶片,具有开发成抗马铃薯晚疫病生物农药的潜在价值。