【摘 要】
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甘氨酸受体是大型Cys-loop超家族成员,在结构上与众多配体门控离子通道相类似。甘氨酸受体被激活后,氯离子可以选择性地通过其中央孔道,进而导致神经元超极化,介导中枢神经系
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甘氨酸受体是大型Cys-loop超家族成员,在结构上与众多配体门控离子通道相类似。甘氨酸受体被激活后,氯离子可以选择性地通过其中央孔道,进而导致神经元超极化,介导中枢神经系统的抑制性神经信号传递。甘氨酸受体广泛分布于中枢神经系统,其中脑干、脊髓尤为丰富。甘氨酸受体的功能可受到很多外源性药物以及生物体内源性分子的影响和调节,例如:大麻素、酒精、锌离子、类固醇等。维生素C也称为L-抗坏血酸(L-ascorbic acid),其对于生物体的重要意义已有大量的文献进行了说明,并且维生素C在脑组织中以及神经细胞内的含量十分丰富。然而,目前尚无维生素C和甘氨酸受体相互关系的研究报道。因此,我们在转染表达甘氨酸受体的HEK-293T细胞上,通过电生理膜片钳的方法,试图探究维生素C对甘氨酸受体的功能是否存在影响。为了达到这一探究目的,我们首先将可以表达甘氨酸受体不同亚型的质粒和表达绿色荧光蛋白的质粒以共转染的形式转入HEK-293T细胞中。分别对细胞给予不同浓度的维生素C及对照溶液进行孵育,随后使用全细胞膜片钳技术记录对上述细胞施加甘氨酸所诱发的电流。我们发现,维生素C能够剂量依赖地增加甘氨酸受体α1和α3亚基所介导的电流幅度,其中α3亚基对维生素C最为敏感。维生素C对甘氨酸受体α2亚基所介导的电流没有产生明显的影响。细胞内给予高浓度的维生素C也可以增强甘氨酸受体介导的电流。给细胞孵育维生素C转运体的阻断剂并不能影响维生素C对甘氨酸受体功能的增强作用。甘氨酸受体α3亚基第三跨膜片段上的第307位氨基酸突变(S307A)显著地抑制了维生素C的作用。结合上述实验结果,提示维生素C与甘氨酸受体的结合位点可能位于其跨膜片段中。
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