针对2015年7月底8月初湖北省鹤峰县五里乡村民食用生蜂蜜中毒事件,笔者于2016年8月初对该县有关地区进行踏勘、走访和采样,结合该地食用生蜂蜜中毒事件的资料和调查报告,对当地有毒蜜源植物的种类、特征和分布情况进行调查研究,发现该地区主要的有毒蜜源植物为昆明山海棠和马桑,其次为醉鱼草、雷公藤和紫茎泽兰,少量分布有白杜鹃、曼陀罗、博落回、羊踯躅。本研究采用UPLC-MS/MS技术,对鹤峰县五里乡涉事蜂蜜中毒性成分来源进行排查。在有毒蜂蜜样本中未检测到博落回及狼毒植物相关化学成分,却有9个化学成分与雷公藤植物中化学成分匹配,并通过对照品确认了雷公藤甲素的存在。经综合分析,认为本次出现中毒事件的有毒蜂蜜蜜源与博落回及狼毒植物无关,而与雷公藤植物高度相关。由此,进一步建立了UPLC-MS/MS检测蜂蜜中雷公藤甲素等物质的分析方法并进行方法学验证。以乙腈-0.8mmol/L甲酸铵水溶液(PH:2.9±0.2)梯度洗脱,采用ESI~+、MRM模式检测蜂蜜中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素、雷公藤酯甲,发现各目标化合物在相应的线性范围内线性良好(R2>0.9995);检出限分别为:1.12ng/mL,1.08ng/mL,0.288ng/mL,2.52ng/mL;各目标化合物低、中、高浓度回收率范围为98.86%-110.56%;各化合物在-20℃,6℃保存时7天内稳定性良好,RSD范围为4.65%-14.59%;仪器日内和日间精密度良好,RSD范围为1.97%-10.70%。所建方法简便、快速、灵敏度高、稳定性好、准确度高,可为蜂蜜中雷公藤类物质的筛查提供技术支持。本研究旨在为减少或预防食用蜂蜜中毒事件发生及蜂蜜样本中毒性成分的蜜源溯源分析提供参考,为蜂蜜中雷公藤类有毒物质的筛查提供基础,为蜂产品食品安全的风险评估提供指导。