【摘 要】
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目的：多药耐药(multidrug resistance，MDR)是肿瘤化学治疗的主要障碍，使得胆管癌的化学治疗效果差，本研究拟在源于人的肝门部胆管癌原发灶的胆管癌细胞系FRH-0201的基础上建立胆
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目的：多药耐药(multidrug resistance，MDR)是肿瘤化学治疗的主要障碍，使得胆管癌的化学治疗效果差，本研究拟在源于人的肝门部胆管癌原发灶的胆管癌细胞系FRH-0201的基础上建立胆管癌细胞阿霉素耐药株FRH-0201／Adm，并研究其生物学特性，为探讨恶性肿瘤细胞对化疗耐药的机制并且体外逆转肿瘤MDR的新方法，克服当前化学治疗肿瘤中存在的这一主要障碍奠定一个研究的基础平台。 方法：选择我们建立并已经传代的原发肝门部胆管癌细胞系(FRH-0201)，已传至第120代，细胞生长稳定，用2μg／ml阿霉素(adriamycin，ADM)间歇性作用诱导法逐渐筛选出耐药细胞，最终建立了能在1μg／ml阿霉素浓度的培养液中生长并传代的胆管癌细胞阿霉素耐药株FRH-0201／Adm。以FRH-0201为对照，通过光镜观察细胞的形态变化，通过MTT绘制生长曲线观察细胞的生长规律和倍增时间；用酶联免疫吸附试验检测细胞的肿瘤标志物CA19-9和CA125的变化情况；用MTT法检测耐药性即耐药指数的改变；流式细胞术检测细胞的周期分布的变化；逆转录PCR检测了mdr1基因mRNA表达量。免疫组织化学抗体染色检测细胞表面耐药基因(mdr1)的表达产物p-糖蛋白(p-glycoprotein，p-gp)表达。激光共聚焦显微镜观察细胞内阿霉素药物浓度的变化以观察癌细胞的膜蛋白的功能变化情况。
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