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第一部分人膀胱癌细胞株高侵袭性亚群的体外筛选目的:利用体外模型筛选人侵袭性膀胱癌细胞株T24的高侵袭性亚群,并观察其体外侵袭能力与运动能力的变化。方法:采用改良的Boyden小室侵袭实验方法,在体外经三次,筛选出人侵袭性膀胱癌细胞株T24的高侵袭性亚群,命名为T24-Ⅲ。绘制子代细胞T24-Ⅲ与母代细胞T24的体外生长曲线,用改良的Boyden小室比较这两种细胞的体外侵袭能力与体外运动能力,荧光定量RT-PCR检测两种细胞的MMP-7mRNA表达水平。结果:1经过三次筛选,获得子代细胞T24-Ⅲ细胞,与母代细胞T24的形态特征、细胞状态及所需的体外培养环境均无明显差异;2细胞培养第2、4、6天,T24-Ⅲ细胞的体外增殖能力与T24细胞无明显变化,第8天,T24细胞的体外增殖能力略强于T24-Ⅲ;3 T24-Ⅲ细胞的侵袭细胞数的均数约为T24细胞的3.4倍,T24-Ⅲ细胞对人工基底膜的侵袭力强于其母代细胞T24(p<0.001);细胞侵袭实验中,侵袭后的细胞大部分贴附于侵袭膜的背面,只有小部分细胞脱离侵袭膜(p<0.001);4 T24-Ⅲ细胞的体外趋化性运动细胞数约为T24细胞的3.2倍,T24-Ⅲ细胞的体外趋化性运动能力明显强于其母代细胞T24(p<0.001);5细胞体外侵袭力与体外趋化性运动能力呈正相关,F=44.789,υ1=1,υ2=17,p<0.001。标准化相关系数为0.858,t =6.692,υ=16, p<0.001;6 T24-Ⅲ细胞的MMP-7mRNA表达值为22.8828±24.2435,T24细胞为12.4750±11.2905,前者的均数较后者有升高趋势,但其差别无统计学意义(p =0.08)。结论:本实验用改良的Boyden小室侵袭实验成功地筛选出了人侵袭性膀胱癌细胞株T24的高侵袭性亚群T24-Ⅲ,其体外侵袭力与体外趋化性运动能力均强于母代细胞T24;两种细胞的体外侵袭力与体外趋化性运动能力呈正相关;体外培养条件下,二者的MMP7mRNA表达水平无明确差异。第二部分hu-PBL-SCID鼠膀胱癌模型的建立及其生物学特性观察目的:建立人外周血淋巴细胞免疫重建的SCID鼠膀胱癌淋巴道转移模型,观察体外筛选获得的人膀胱癌细胞株高侵袭性亚群T24-Ⅲ细胞与其母代细胞T24的体内侵袭与转移