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目的: 分析临床胆道闭锁（Biliary atresia, BA）患儿肝组织中胆道上皮细胞的发育情况，并建立洹河猴轮状病毒感染诱导的小鼠胆道闭锁动物模型，利用这一模型来观察Notch信号通路靶基因HES1与胆道上皮细胞发育的关系，从而探讨HES1基因的表达在胆道闭锁疾病中的意义。 方法: 1、收集临床胆道闭锁、胆总管囊肿、门静脉海绵样病变患儿肝组织标本，利用HE染色及免疫组化染色技术观察肝组织中胆道上皮细胞的发育情况，以及应用扫描电镜的来观察其超微结构。 2、制备轮状病毒悬液，并测定其滴度达到1*107PFU，然后用出生24小时内的Balb/c乳鼠腹腔注射20ul的轮状病毒液，制成胆道闭锁动物模型，对照组仅注射病毒培养液，于第3、7、14、21天分别收取肝脏及肝外胆道组织。 3、利用H&E、免疫组化染色来观察动物模型中胆道上皮细胞的发育，用RT-PCR检测并筛选Notch信号通路相关基因在动物模型中的表达。 4、用Western-blot、免疫组化等方法来在动物模型临床病理标本中进行验证。 结果: 1、CTPV组的肝组织可见胆道上皮细胞CK19强阳性，其胆管呈规则管状，细胞形态结构正常；BA中胆道上皮细胞异常增生，大部分为EpCAM强阳性，无规则管状结构，细胞形态结构畸形、紊乱。电镜观察结果与CC比较，在BA肝组织中可见胆管狭窄、闭塞，有胆盐沉积，胆道细胞微绒毛的减少，细胞间隙增宽，紧密连接减少。 2、BA鼠肝组织中免疫组化显示胆道上皮细胞数量减少，且发育不成熟， RT-PCR和Western-blot结果显示在第7天（p=0.00011）和14天（p=0.00016） Notch的靶基因HES1的表达持续下降。 3、免疫组化显示HES1在BA患儿肝脏组织中成熟的胆管中表达较高，高于CC组，并且在同一BA切片中CK19阳性的成熟胆道上皮细胞表达多于EpCAM阳性的不成熟胆道上皮细胞。 4、BA及CC标本中纤维组织伴随着EpCAM阳性不成熟细胞的增生而增多，并且在不同的肝纤维化分组中EpCAM阳性的不成熟胆道上皮细胞数量的表达是有差异的（r=0.56，P=0.00015）。 结论: 1、BA中异常增殖的胆道上皮细胞主要为发育不成熟的胆道上皮细胞。 2、Notch信号通路靶基因HES1在胆道闭锁小鼠动物模型中表达下调，说明HES1可能参与了BA的形成。 3、HES1在不成熟胆道上皮细胞中表达下调，提示与胆道上皮细胞成熟及胆管形成有关，可能是胆道闭锁的发病机制之一。 4、BA中不成熟胆道上皮细胞与肝纤维化呈正相关关系，可能参与了BA肝纤维化过程。