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目的:维生素A(Vitamin A)是食品重要的添加剂,研究证实维生素A对肠道有一定的保护作用,但其对肠道的作用机制尚未清楚。肠道屏障黏膜的功能与肠道炎症以及临床上多数疾病的发生发展密切相关,肠道屏障主要功能为防止病原菌等致病性的抗原侵入,以及分隔肠腔内物质。紧密连接(Tight junction)是构成肠道屏障重要组成部分,肠上皮细胞间的连接形成屏障以维持组织的稳态,肠道结构的完整性和通透性破坏会影响肠道功能的正常发挥。肠上皮细胞屏障出现“泄露”会导致肠道炎症(Inflammatory Bowel Disease),免疫性疾病以及系统性炎症等一些疾病。本论文旨在探讨维生素A如何影响紧密连接蛋白的表达以及抑制肠道炎症的作用研究。方法:采用猪小肠上皮细胞IPEC-J2细胞系,用不同浓度维生素A(0-20μmol/L)和LPS处理,研究维生素A如何影响紧密连接蛋白的表达以及抑制肠道炎症的作用。首先跨上皮电阻TEER(Transepithelial electrical resistance)检测IPEC-J2细胞渗透性变化,蛋白免疫印迹WB(Western blot),逆转录酶-聚合酶链反应RT-PCR(Reverse transcriptase-polymerase chain reaction)检测紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-1蛋白和m RNA水平的表达;免疫荧光IF(Immunofluorescence)检测紧密连接蛋白Zo-1、Claudin-1的定位和表达。并且采用断奶仔猪动物模型,探讨维生素A对肠道紧密连接蛋白影响的变化。结果:TEER实验证实LPS处理能够显著下调IPEC-J2细胞的阻值,增加细胞渗透性,加入0.1μmol/L维生素A后,阻值上升,单独使用0.1μmol/L维生素A上调细胞阻值,降低细胞的渗透性。WB和RT-PCR检测出不同浓度的维生素A(0-2μmol/L)上调紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-1蛋白和m RNA水平的表达;断奶仔猪动物实验结果显示维生素A上调肠道组织紧密连接结构蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-1蛋白和m RNA水平的表达,并且对十二指肠的影响最显著。结论:维生素A显著增强紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-1的表达并且缓解LPS诱导的肠道炎症;维生素A对肠道屏障结构蛋白具有保护作用。