研究背景与目的：　　现代辅助生育技术（assisted reproductive technology，ART）的诞生，为临床治疗不孕症带来了新方法，也为无数盼子心切的家庭解决了烦恼。　　世界上首例试管婴儿是在1978年通过自然周期获卵后，进行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）而获得的，接下来生殖专家们逐渐通过超排卵（super ovulation）来获取更多卵子，从而提高IVF-ET的临床妊娠率。随着ART的快速进展，控制性超促排卵（controlled ovarian hyperstimulation，COH）方案逐渐普及，使周期获卵数大幅增加。ART中另有一种激素替代治疗（hormone replacement therapy，HRT）方案，是在冻融胚胎移植（frozen-thawed embryo transfer，FET）前做内膜准备，主要适用于月经周期不规律的患者等。　　虽然ART已经问世三十余年，体外受精率可高达90％，但是临床妊娠率仍然偏低，约30%-60%。因此众多专家质疑，上述各种治疗方案可能会使患者的性激素超出生理水平，影响了体内微环境，降低子宫内膜容受性（endometrial receptivity），导致妊娠失败。因此，对子宫内膜容受性的研究，近年来在生殖领域中越来越受到重视。　　在一个月经周期中，胚胎能够植入子宫内膜的时间非常短暂，也就是所谓的“种植窗期”（implantation window），通常在人月经周期的20-24d。子宫内膜容受性是指子宫内膜对于胚胎的接受能力。胚胎着床需要多种分子共同参与，例如白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、整合素αVβ3（IntegrinαVβ3）等等。多项研究表明，LIF、IL-1β、整合素αVβ3在子宫内膜的高表达时间与种植窗开放同步，因此它们可作为子宫内膜容受性的标志物。前期学者的动物实验发现，HRT、COH与超排卵等方案会降低小鼠的子宫内膜容受性，且程度依次加重。　　本课题通过研究在超排卵方案、COH方案以及HRT方案中，上述分子在人种植窗期子宫内膜上的表达情况，从而比较ART临床中这三种常用的治疗方案对人子宫内膜容受性的影响，为优化临床用药方案、提高妊娠率提供更加可靠的理论依据。　　材料与方法：　　1.材料来源　　实验组：2014年6月至2015年12月于我院生殖中心，经超排卵后因卵泡发育多，改行体外受精（in vitro fertilization，IVF）/卵胞浆内单精子显微注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）助孕，取卵后取消移植者；或接受COH方案促排卵后行 IVF/ICSI助孕，取卵后取消移植者；以及 FET前，接受 HRT方案调节子宫内膜，但本周期取消FET者。　　对照组：自然周期生理状态，未用任何药物者。　　各研究对象于术前签署伦理委员会批准的知情同意书，按照下述分组时间，通过子宫内膜取样器收集子宫内膜。　　2.实验分组　　（1）超排卵组：取卵后5、6d分别为超排卵5d组、超排卵6d组（各5例）。　　（2）控制性超促排卵(COH)组：取卵后5、6d分别为COH5d组、COH6d组（各10例）。　　（3）激素替代治疗(HRT)组：加用黄体酮后5、6d分别为HRT5d组、HRT6d组（各5例）。　　（4）对照（自然周期）组：排卵后5、6d分别为自然周期5d组、自然周期6d组（各10例）。　　共分为四大方案组，每个大组再各分为两个亚组。每例患者均只取样一次，而不是连续两天取样。每例内膜均分为两份固定，一份做免疫组化，另一份送病检。　　3.实验方法　　免疫组化 SP法，检测各组种植窗期子宫内膜上 LIF、IL-1β、整合素αVβ3蛋白的定位和半定量表达（IOD值）。　　4.统计方法　　通过SPSS22.0软件处理数据，计量资料用均数±标准差（X±S）表示，两组样本间的均数比较采用两个独立样本t检验，多组样本间均数比较采用单因素方差分析，两两比较采用Bonferroni法，P<0.05认为差异有统计学意义，以α=0.05为检验水准。　　结果：　　1．各组研究对象的一般资料：平均年龄、不孕年限、BMI、基础FSH、取样日内膜厚度，比较均无显著性差异（P>0.05）。　　2．各组子宫内膜的病检结果均提示：分泌期内膜，未见特殊病理情况。　　3．LIF、IL-1β、整合素αVβ3均主要定位于种植窗期子宫内膜腔上皮与腺上皮细胞的胞浆中，三种蛋白在超排卵组、COH组子宫内膜上呈弱阳性表达，HRT组阳性，自然周期组强阳性。　　4．在自然周期组、HRT组、COH组、超排卵组的5d组中：LIF蛋白的表达量分别为149.95±14.51、133.82±6.61、117.51±10.87、92.43±12.71；IL-1β蛋白的表达量分别为143.97±16.36、124.56±8.58、104.39±12.24、79.33±18.69；整合素αVβ3蛋白的表达量分别为141.61±9.69、126.97±8.91、112.92±9.92、78.45±18.69。三种蛋白表达量的组间比较结果均为：自然周期5d组﹥HRT5d组﹥COH5d组﹥超排卵5d组，差异均有显著性（P<0.01）。　　5．在自然周期组、HRT组、COH组、超排卵组的6d组中：LIF蛋白的表达量分别为157.01±10.35、139.17±5.79、111.71±17.02、81.35±9.39；IL-1β蛋白的表达量分别为148.83±10.72、130.74±7.01、94.85±20.53、66.79±10.79；整合素αVβ3蛋白的表达量分别为149.36±11.48、131.91±9.99、105.82±18.41、70.12±6.44。三种蛋白表达量的组间比较结果均为：自然周期6d组﹥HRT6d组﹥COH6d组﹥超排卵6d组，差异均有显著性（P<0.01）。　　6．在四大方案组的5d组与6d组之间，分别进行组内两两比较时（超排卵5d组与6d组相比、COH5d组与6d组相比、HRT5d组与6d组相比、自然周期5d组与6d组相比），三种蛋白的表达量均无统计学差异（P>0.05）。　　结论：　　1．LIF、IL-1β、整合素αVβ3三种分子可以联合起来，作为人种植窗期子宫内膜容受性的标志物。　　2．HRT方案会使人种植窗期子宫内膜容受性轻度减弱，COH方案对其减弱程度较重，而超排卵方案对其不良影响最大。　　3．在促排卵过程中，应充分评估子宫内膜容受性。当其评估下降，不利于鲜胚移植时，应采取全胚冷冻，之后再根据适应证选择自然周期方案或HRT方案进行FET。