目的本实验通过对高糖作用下大鼠肾小管上皮细胞蛋白质组学动态变化的观察，了解高糖环境对大鼠肾小管上皮细胞蛋白质成分的影响，从而希望找到糖尿病肾病发生发展的机制。方法1将肾小管上皮细胞分别置于含正常糖浓度组（含糖5.5mM）、高糖组（含糖30mM）的培养基中进行体外培养，分别在8小时、72小时、25天后分别提取细胞总蛋白。2将分离的总蛋白运用双向电泳技术进行分离。3分离后的凝胶应用Image Master2D Platinum6.0软件对其2-DE图像进行分析，通过统计学方法评价双向凝胶电泳结果的重复性和可靠性，运用方差不对齐的t检验获得P值，P<0.05并且该点的volume%值变化超出2倍作为标准，找出差异蛋白点。4通过质谱技术（MALDI-TOF, MALDI-TOF-TOF, LC-MS-MS）对找出的差异蛋白点进行鉴定，然后对鉴定出的差异蛋白进行生物信息学分析。5利用MASCOT数据库进行检索，其差异蛋白点的判定标准是以得分大于60，并且覆盖序列大于15%，测量与预测分子量之间相差小于30%，测得的等电点与预测等电点相差小于2.0。最后再利用PUBMED查询差异蛋白的功能。结果1双向电泳凝胶平均获得了蛋白点956.33±21.37个，832个点在所有胶上均出现，匹配率为87%。2运用双向电泳技术分析高糖及正常培养基的肾小管上皮细胞的蛋白组学，发现8个差异蛋白点经过矫正后（P<0.05）通过质谱鉴定，它们分别是：膜突蛋白（moesin），膜联蛋白A4（annexin A4），电压依赖性阴离子通道蛋白2（voltage-dependent anion-selective channel protein2VDAC2），磷酸变位酶1（phosphoglycerate mutase1），细胞核酸结合蛋白2（cellular nucleic acid-bindingprotein isoform2），基质细胞衍生因子2-类蛋白1前体（stromal cell-derived factor2-like protein1precursor，SDF2L1），加帽蛋白，凝溶胶蛋白样，异构型CRA_b（capping protein, gelsolin-like, isoform CRA_b），核苷二磷酸激酶A（nucleosidediphosphate kinase A）。结论通过对蛋白组学的研究，找出了8种差异蛋白，提示这些蛋白的上调或下调与高糖环境密切相关，为糖尿病肾病的机制研究提供了新的思路。