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灵芝是我国珍贵的药食两用保健药用真菌,灵芝三萜具有丰富的生物活性。本文通过对灵芝三萜超声波提取工艺的研究,为灵芝三萜的理化性质、生理活性等方面的进一步研究提供了高效的提取途径,也为灵芝三萜的开发利用、高效利用灵芝资源提供理论根据和实验方法。本文以提高灵芝三萜提取率为目的,研究赤芝和紫芝在不同生长期的三萜含量,然后通过单因素实验研究各种因素(包括乙醇浓度、料液比、超声时间、超声温度、超声功率)对灵芝三萜含量的影响。在此基础上,再用正交实验,进行4因素3(L34)水平分析,探讨各因素的交互作用,最后得出赤灵芝和紫芝三萜类物质超声波提取的最佳工艺条件。研究表明,提取灵芝三萜的最适工艺条件为:样品量500mg,赤灵芝在超声波功率为250W,乙醇浓度为75%,料液比为1:15,提取时间为40 min,提取温度为60℃的条件下,赤灵芝三萜一次提取得率为1.941%;紫灵芝在超声功率为100W,温度为80℃,乙醇浓度为80%,料液比为1:35,提取时间为30min的条件下,紫灵芝三萜的一次提取收率为0.934%。利用指纹图谱分析技术,建立了赤芝三萜酸成分的指纹图谱分析方法,拟定赤芝指纹图谱共有模式,并用于评价赤芝与紫芝的质量差异,为灵芝药材与灵芝制剂质量控制提供一定的参考依据。采用HPLC法测定,色谱柱为A型号C18柱,流动相为乙腈-2%冰醋酸(梯度洗脱),检测波长为252nm,流速为1mL?min-1,柱温为35℃。结果表明,在18批赤芝、7批紫芝中共标示出29个共有峰,对比对照品鉴定了其中三个成分(灵芝酸A、C2、G),其中灵芝酸A为最强峰;本研究确定了紫芝的三萜酸成分指纹图谱,虽然紫芝与赤芝的共有峰类似,但研究表明紫芝的单位生药峰面积只有赤芝的1/10~1/20;不同入土时间的指纹图谱表明,赤芝入土60天、紫芝入土60-70天,三萜酸含量相对较高,为灵芝的最佳采收期。