第一部分 大鼠药物性牙龈增生模型的建立实验目的：以SD雄性大鼠为实验对象,建立药物性牙龈增生的动物模型。实验方法：选择两种致药物性牙龈增生的代表药物,分别为抗癫痫药苯妥英钠和钙通道阻滞剂硝苯地平,给药方式为全身给药(口服),给药时间设定为25天、50天、75天,按不同给药时间对大鼠进行分组,对大鼠进行给药实验,每日给药一次,给药期结束后,处死实验鼠,收集上下颌骨及牙周组织,在体视显微镜下观察并测量牙龈厚度的变化,然后石蜡包埋切片,HE染色及免疫组化,并分析实验结果。实验结果：在苯妥英钠或硝苯地平长期口服给药下,SD雄性大鼠的牙龈表现出较为明显的增生(p<0.01或p<0.05),与对照组比较发现,实验组牙龈厚度增厚,牙龈上皮钉突伸长。结论：苯妥英钠和硝苯地平长期全身用药,可以诱导大鼠牙龈组织的药物性增生。第二部分苯妥英钠局部注射给药对大鼠牙龈的作用实验目的：在SD雄性大鼠上颌磨牙的牙龈局部注射致牙龈增生的药物苯妥英钠溶液,观察苯妥英钠对SD大鼠牙龈的作用情况。实验方法：SD雄性大鼠行进行全身麻醉,采用自身对照的方法,在大鼠上颌一侧的第一磨牙颊侧龈颊沟黏膜下注射苯妥英钠溶液,每日给药一次,给药剂量为20ul,间隔24小时,40天后处死实验鼠,收集大鼠上颌骨及牙周组织,观察并测量大鼠牙龈厚度的变化。实验结果：给药结束后收集分析数据结果显示,局部注射苯妥英钠溶液后,与对照组相比,大鼠实验组的牙龈并未出现增生(p>0.05)。结论：以苯妥英钠溶液的形式进行局部注射给药不能诱导大鼠牙龈增生,有必要改进给药方法和剂型。第三部分载苯妥英钠、硝苯地平、环孢素的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)缓释微球对牙周组织再生的作用实验目的：苯妥英钠、硝苯地平、环孢素是三大类致药物性牙龈增生药(抗癫痫药,钙通道拮抗剂,免疫抑制剂)的代表药,通过一种生物相容性材料PLGA作为载体,将这三种药物分别导入大鼠牙龈退缩模型中,以缓释给药的方式,检验三种药物,对牙龈退缩的治疗效果。实验方法：1.制备苯妥英钠、硝苯地平、环孢素三种药物的PLGA缓释微球；2.通过高效液相色谱法检验三种PLGA缓释微球在体外释放的药物成分、释放浓度及释放时间；3.在SD雄性大鼠上颌磨牙区制备牙龈退缩的动物模型；4.将三种载药微球导入制备好的牙龈退缩大鼠牙槽骨缺损处,2个月后,处死取材,在体视显微镜下观察牙龈增生情况,显微CT观察牙槽骨再生,大鼠上颌颌骨及牙周组织石蜡包埋切片,检测胶原纤维相关蛋白,成骨细胞、破骨细胞相关蛋白的表达。实验结果：1.三种药物的PLGA缓释微球制备成功,宏观形态及扫描电镜下形态良好,符合文献描述；2.高效液相色谱分析结果显示,苯妥英钠组和硝苯地平组药物释放良好,长期保持较高的浓度,环孢素组药物释放浓度下降较快,不能保持长期较高浓度；3.在SD雄性大鼠上颌磨牙区制备的牙龈退缩模型成功,实验组牙龈相比于对照组出现了退缩；4.苯妥英钠和硝苯地平的PLGA缓释微球对大鼠牙槽骨骨质的再生和牙龈胶原的增加有促进作用,环孢素没有表现出促进作用。其中,苯妥英钠的药效最为显著,新生牙槽骨面积、新生牙槽骨高度显著高于对照组(p<0.01),牙龈厚度显著高于对照组(p<0.01)。结论：1.苯妥英钠局部缓释给药可以显著促进牙周组织再生,可以用于治疗牙龈退缩和牙槽骨吸收。2.PLGA微球作为一种生物相容性良好的药物载体,它缓释的特性、微小的尺寸,可能是最适宜用于治疗牙周组织疾病的载体,起到了组织支架的作用,应用前景较为广阔。