背景:柴胡皂苷D（Saikosaponin D,Ssd）是一种从柴胡根部提取出来的具有抗肿瘤活性的药物分子。虽然柴胡皂苷D广泛的药理作用为人们所熟知,但其对肺癌A549细胞的抗肿瘤作用机理还不明确。在此,本研究旨在探讨柴胡皂苷D是否通过JNK信号通路对肺癌A549细胞产生影响的作用机制。方法:为了研究柴胡皂苷D对A549细胞的影响,我们分析了柴胡皂苷D（Ssd）和JNK抑制剂SP600125单独或联合处理的A549细胞周期阻滞和分布、凋亡和增殖的变化。利用q RT-PCR和Western blot从m RNA转录与蛋白翻译水平分别检测了18个周期蛋白的表达,同时通过独创性通路分析IPA方法构建18个细胞周期蛋白的相互作用网络。结果:分析18个细胞周期调控因子和JNK与磷酸化JNK（p-JNK）的表达水平,其结果显示Ssd对这些因子具有增强作用。SP600125抑制剂的加入进一步提高了p53/p21和Rassfia的表达,而Ssd所引起的上述其他因素的表达水平却被减弱或消除了。独创性通路分析（IPA）结果揭示Ssd通过激活TGFβ-p53/p21/p27/p15/p16和TGFα-Rassfia-Cyclin D1通路参与抑制A549细胞的增殖,加入SP600125抑制剂处理可增强抑制增殖效应。另外,Ssd还通过激活TGFα-JNK-p53和TGFα-Rassfia-MST1通路诱导细胞凋亡。加入SP600125抑制剂抑制JNK的表达减弱了Ssd诱导的TGFα-JNK-p53凋亡轴,Ssd所诱导的凋亡也被消除了。在JNK/p-JNK与p53/p-p53形成协同和拮抗反馈回路中,我们分析JNK/p-JNK、p53、p-p53和TNF-α水平,发现Ssd诱导的细胞凋亡依赖于由JNK/p-JNK介导的p-p53活性。当减弱JNK/p-JNK对p53的负调控,SP600125增强p53水平和Ssd诱导的TGFβ-p53/p21/p27/p15/p16抑制增殖轴。结论:以上结果表明,JNK/p-JNK与p53/p-p53形成的反馈环在A549细胞中两种药物的协同和拮抗作用中起着中心协调的作用,为Ssd与SP600125联合治疗肺癌提供了理论依据。