低温保存同种主动脉和肺动脉移植物免疫排斥反应研究

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前言为探讨同种异体血管移植物对宿主免疫状态的影响以及排异反应对血管移植物的作用,本研究通过低温保存的大鼠同种异体带瓣主动脉和肺动脉异位移植模型的研究,探讨低温保存对同种血管移植物抗原性的影响,观察同种血管移植后宿主体液和细胞免疫指标的变化,以及移植物的病理改变。研究免疫抑制剂治疗对同种血管移植的作用效果。方法1、采用液氮低温保存方法长期保存同种主动脉和肺动脉,应用透射电镜观察低温保存对同种主动脉和肺动脉内皮结构和组织完整性的影响。2、制作动物模型,将低温保存的SD大鼠的主动脉或肺动脉异位植入大鼠的腹主动脉,分组:主动脉移植组、肺动脉移植组、主动脉免疫治疗(CsA)组、对照组。在移植后1、2、3、4、5周收集移植动物血清标本,同时取出血管移植物。3、移植物切片常规HE染色,测定其增厚内膜与中层比值及移植物外膜单核细胞浸润数。免疫组化染色测量MHCⅡ阳性表达,淋巴细胞涂片免疫组化测定CD4+、CD8+百分率。应用酶联法测定血清中IL-2含量和TNF-α含量。结果电镜结果显示低温保存方法能够保存同种主动脉和肺动脉内皮细胞的活性和结构的完整性。大鼠同种移植后1周出现血管内皮细胞损伤,内膜增厚,并逐渐加重。大量炎症细胞浸润移植物外膜和中层,术后炎症细胞浸润数长时间维持在很高水平。移植后1-4周可见MHCⅡ显著阳性,CD4+、CD4+/CD8+比值明显增高。血清中IL-2和TNF-a含量明显增高,并在术后5周内维持很高水平,上述结果与对照组比较均有显著差异(p<0.05)。CsA治疗对移植物内膜增厚、淋巴细胞浸润、MHCⅡ表达、T淋巴细胞激活、IL-2和TNF-a含量增高具有明显的抑制作用(p<0.05)。主动脉与肺动脉同种移植在内膜增厚、淋巴细胞浸润、MHCⅡ表达、T淋巴细胞激活、IL-2和TNF-a含量增高方面没有显著差异(p>0.05)。结论一、液氮低温保存同种异体主动脉和肺动脉能保持其生物活性和组织结构完整性。二、低温保存同种异体主动脉和肺动脉移植后有明确的免疫排斥反应发生,细胞和体液免疫均参与免疫排斥反应过程,慢性免疫排斥反应以细胞免疫为主。三、低温保存同种异体主动脉和肺动脉移植物的病理改变为内膜进行性增厚、中层平滑肌细胞变性坏死、外膜大量淋巴细胞浸润,导致同种管道钙化和阻塞。四、低温保存同种异体主动脉和肺动脉移植后在免疫反应方面无显著差异,其移植后的钙化与免疫排斥反应有关。五、环孢霉素A对同种异体移植后的免疫排斥反应和钙化有明显的抑制作用。
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