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目的:IL-24(interleukin24)基因是一个既能抑制肿瘤生长,又能表达刺激免疫系统蛋白的基因。研究发现IL-24对人多种肿瘤细胞均有选择性抑制作用。而人脑胶质瘤的发生、生长是否与IL-24/MDA-7基因及蛋白表达异常有关,有待于进一步探索研究。本研究通过研究人脑胶质瘤IL-24/MDA-7基因及蛋白表达是否异常,以及信号蛋白PKR、p38-MAPK的表达情况来进一步探讨其对人脑胶质瘤的影响作用。
方法:留取手术切除的人脑胶质瘤标本(肿瘤组)30例及内减压术切除的正常脑组织标本(对照组)7例,去除出血、坏死及电灼组织,采用染料法(Syber Green I)实时荧光定量RT-PCR检测IL-24以及信号蛋白PKR、p38-MAPK的mRNA的表达,用免疫组化方法检测IL-24以及信号蛋白PKR、p38-MAPK的蛋白表达水平。应用AB17300型荧光定量PCR仪自带分析软件SDS V1.3.2.10,以GAPDH为内参照基因,与对照组相比,得到各样本中目的基因表达的相对定量值(RQ值)。采用ANOVA单因素方差分析,我们将RQ值用于统计分析,检验水准为P<0.01。用免疫组化方法检测正常人脑组织和各组肿瘤组织中IL-24、PKR及p38-MAPK的蛋白表达水平。
结果:1实时荧光定量RT-PCR结果显示,正常人脑组织和人脑胶质瘤肿瘤组织均有IL-24、PKR及p38-MAPK的表达。在人脑胶质瘤肿瘤组织中IL-24、PKR及p38-MAPK的mRNA表达水平低于正常人脑组织(P<0.01)。
2通过免疫组化技术,也证实了正常人脑细胞和人脑胶质瘤肿瘤组织中IL-24、PKR及p38-MAPK表达情况存在明显差异。发现人脑胶质瘤IL-24表达明显降低,且PKR和p38-MAPK表达也明显降低(P<0.01)。
结论:人脑胶质瘤中IL-24/MDA-7基因以及信号蛋白PKR、p38-MAPK的表达明显降低。这说明IL-24/MDA-7基因表达异常可能是影响人脑胶质瘤发生、生长的重要因素。